用腺相关病毒载体介导人血管内皮生长因子受体KDR胞外区基因的表达  

Expression of Extracellular Domain of VEGF Receptor KDR with Recombinant AAV

作　　者：曾革非[1] 张立国[1] 张智清[1] 

机构地区：[1]中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室,北京100052

出　　处：《生物工程学报》2001年第4期388-391,共4页Chinese Journal of Biotechnology

基　　金：国家高技术研究发展计划项目资助! (10 2 0 8 0 1 0 3 )&&

摘　　要：新生血管大量形成在实体瘤的生长和转移中起着关键的作用。血管内皮生长因子 (VEGF)是介导肿瘤血管生成的最主要因素。从原代培养的人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)提取细胞总RNA ,采用逆转录PCR(RT PCR)方法得到VEGF受体KDR胞外区cDNA片段。将获得的受体基因克隆到AAV基因治疗载体pSNAV中 ,得到重组质粒pSNAV KDR。重组质粒转染BHK细胞 ,加入辅助病毒后 ,获得了表达目的蛋白的重组AAV。重组病毒表达的KDR在体外实验中具有与VEGF结合的活性。在体内实验中 ,重组AAV感染的黑色素瘤细胞在小鼠中形成肿瘤的血管化程度明显低于对照组。New vessel formation plays a key role in tumor growth and transforming,and the Vascular endothelial growth factor (VEGF) is the most important factor inducing tumor vessel formation.The cDNA of extracellular domain of VEGF receptor KDR was cloned from primary cultured HUVEC by RT-PCR and subcloned into AAV vector pSNAV.Recombinant AAV was obtained from BHK cells transformed with pSNAV/KDR after adding helper virus.The recombinant AAV expressing soluble KDR that can bind to VEGF.\%In vivo\% experiment demonstrated that the recombinant virus can inhibit the new vessel formation of melanoma in C57 mice model.

关 键 词：血管内皮生长因子 受体 腺病毒伴随病毒 病毒载体 介导 基因表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]