有序差异显示法研究大鼠脑特异基因  

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作  者:康建胜[1] 王治平[1] 金玫蕾[1] 郭宁[1] 王霆 杜雨苍[3] 李荣秀[1] 

机构地区:[1]中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心,上海200233 [2]上海市转基因研究中心,上海201300 [3]中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031

出  处:《中国科学(C辑)》2001年第5期408-415,共8页Science in China(Series C)

基  金:中国科学院生物科学与生物技术研究特别支持费课题(财政部专项)资助项目(批准号: KJ95T-06)

摘  要:有序差异显示法(ordered differential display, ODD)是一种简便的系统研究基因表达谱差异的有效方法. 采用链霉亲和素和生物素的特异亲和性质分离目标cDNA片段, 从而排除非特异DNA片段的影响后, ODD法的重复性和可靠性得到了进一步的改进和完善; 随后利用ODD法对胚胎大鼠脑与身体的基因表达差异进行了初步研究, 得到几十条脑特异表达的EST(expressed sequence tag)片段; 再通过反向杂交、RT-PCR实验和EST结果分析, 验证了改进后的ODD方法的结果可靠, 假阳性率低, 重复性好, 同时, 还对克隆到的脑特异全长新基因rZIC的生理功能进行了初步研究. 将rZIC的反义核酸注射到小鼠侧脑室, 测定小鼠的行为变化. 通过分析实验结果发现, rZIC对维持成年小鼠的运动功能有一定的作用.

关 键 词:有序差异显示法 大鼠脑 反向杂交 反义核酸 行为学 基因表达 特异表达 

分 类 号:Q754[生物学—分子生物学]

 

参考文献:

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