复制酶与运动蛋白编码基因的突变对烟草花叶病毒的弱化效应  

作　　者：杨恭[1] 邱并生[1] 魏军亚[1] 刘广超[1] 

机构地区：[1]中国科学院微生物研究所分子病毒与生物工程开放实验室,北京100080

出　　处：《中国科学（C辑）》2001年第5期416-422,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号: 39770034)

摘　　要：番茄花叶病毒弱毒疫苗K(ToMV-K)的复制酶基因和运动蛋白基因分别具有乳石和赭石突变的特征. 为了对这一致弱特征进行扩展研究, 用PCR介导的定点突变技术, 对烟草花叶病毒普通株中国分离物(TMV-Cv)复制酶基因和运动蛋白基因分别进行乳石突变(UGA)和赭石突变(UAA), 构建了复制酶单突变体--TMV-Cvrase, 运动蛋白单突变体--TMV-Cvmp和复制酶与运动蛋白双突变体--TMV-Cvrase-mp. 烟草侵染试验发现, TMV-Cvmp和TMV-Cvrase-mp能侵染枯斑(Xanthi NC)和系统(K326)寄主, 后者侵染普通烟K326仅出现少量轻微的花叶症状; 子代病毒的电子显微镜观察、重复接种试验及其核酸的RNA斑点杂交、RT-PCR扩增与测序结果表明, TMV-Cvmp和TMV-Cvrase-mp子代病毒与TMV-Cv的大小和形态基本一致, 具有完整和稳定的侵染、复制和繁殖能力, 且其基因组仍保持着突变, 而复制酶单突变体TMV-Cvrase不能侵染烟草. 以上结果表明, 复制酶与运动蛋白的乳石突变与赭石突变协同致弱TMV-Cv对烟草的侵染症状, 从而暗示ToMV-K基因组的这种突变模式也可以用于其他植物病毒的致弱研究.

关 键 词：烟草花叶病毒 复制酶 运动蛋白 弱化效应 基因突变体 乳石突变 赭石突变 

分 类 号：S432.41[农业科学—植物病理学]