Representative cDNA Library from Isolated Rice Sperm Cells  

水稻精细胞cDNA文库的构建及分析(英文)

作　　者：苟小平[1] 徐莺[1] 唐琳[1] 颜钫[1] 陈放[1] 

机构地区：[1]四川大学生命科学学院,成都610064

出　　处：《Acta Botanica Sinica》2001年第10期1093-1096,共4页Acta Botanica Sinica（植物学报：英文版）

基　　金：SupportedbytheProjectERBIC18CT960 0 72ofEuropeanCommission ;theDoctoralFoundationoftheMinistryofEducation ;P .R .C ;andtheSupportingProjectforKeyTeachersinHigherSchoolsoftheMinistryofEducation ;P .R .C .

摘　　要：利用Percoll密度梯度离心和多次滤膜过滤分离到适于分子生物学研究的水稻 (OryzasativaL .cv .Guichao2 )生活精细胞。借助RT_PCR和SMART技术构建了水稻精细胞的cDNA文库。初级文库的大小为 1.5 8× 10 6 pfu ,插入片段平均大小为 980bp。 10 3个随机挑选的克隆与DIG标记的水稻幼苗根、叶及二细胞时期花粉、成熟花粉、精细胞和授粉 5～ 7d的子房cDNA探针杂交表明 ,除少数克隆外 ,它们在上述器官中的表达情况很相似。 10个随机挑选的克隆用来测序及分析 ,有 4个克隆含有完整的开放阅读框。 1个克隆与水稻Polyubiquitin (Rubq1)mRNA高度同源。Northern杂交表明它在二细胞时期花粉、成熟花粉中的表达显著少于在根、叶和授粉子房中的表达。另一个克隆的开放阅读框编码与拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)AtRAD17同源的蛋白。这是第一次正式报道高等植物精细胞cDNA文库的构建 ,也是第一次从高等植物精细胞中分离到其表达的基因。

关 键 词：cDNA library sperm cells Rubq1 AtRAD17 RICE 

分 类 号：S511[农业科学—作物学]