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作 者:韩俊[1] 王明丽[1] 姜永忠[1] 詹以森[1] 李艳秋[1] 余莉[1]
机构地区:[1]安徽医科大学微生物学教研室,合肥230032
出 处:《安徽医科大学学报》2001年第4期257-259,共3页Acta Universitatis Medicinalis Anhui
摘 要:目的 通过蚀斑形成试验测定人巨细胞病毒(HCMV)AD16 9株的蚀斑 (PFU)确定其感染复数 (MOI)并纯化病毒。方法 HCMVAD16 9株接种 7~ 8代HF细胞单层 ,37℃吸附 ,0 0 0 7琼脂糖覆盖层 ,1周后加第 2层覆盖 ,2周后用 0 0 0 0 5结晶紫染色 5min ,记数 ,计算PFU及MOI;染色前 ,镜下挑取蚀斑保藏并鉴定。结果 蚀斑经 0 0 0 0 5结晶紫染色在HF细胞单层上呈紫色 ,很易识别 ,散在均匀分布 ,着色深 ,与周围区域界限明显 ,MOI =3 41× 10 4 。结论 探索出HCMVAD16 9株感染复数 (MOI)Objective To assay human cytomegalovirus multiplicity of infection (MOI). Methods HCMV AD169 strain was inocclated into 7~8 passages HF cells monolayer, adsorped in 37℃, added two agarose overlays within two weeks and stained with 0 000 5 crystal violet. Plaques were counted accurately. For reisolation of virus, plaques were removed with capillary pipettes before staining with 0 000 5 crystal violet. Results Plaques were stained darkly and distinguished easily from the normal HF cell layer; MOI=3 41×10 4. Conclusion Assay method of human cytomegalovirus MOI was found. MOI is a practical and accurate method for quantitation of HCMV AD169 strain.
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