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作 者:冯丽冰[1] 杨立敏[2] 周伟国[2] 黄莉[2] 万敏[2] 赵寿元[2] 李昌本[1]
机构地区:[1]复旦大学生命科学学院遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室,上海200433 [2]复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海200433
出 处:《科学通报》2001年第17期1440-1444,共5页Chinese Science Bulletin
基 金:国家自然科学基金资助项目(批准号:39670407)
摘 要:血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是调节血小板生成最主要的细胞因子,它的生物学效应由其受体c-Mpl介导.用酵母双杂合系统(two-hybrid system)筛选了与c-Mpl膜内部分相互作用的蛋白质.在5×106个转化子中,得到48个阳性克隆.测序结果表明,其中一个是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SGK(serum and glucocorticoid-inducible kinase)的部分编码序列(编码第246位氨基酸至c末端,包括3′端非编码区);另一个为14-3-3 theta亚型蛋白的部分编码序列(编码第67位氨基酸至C末端,包括3′端非编码区).体外GST-Pulldown分析和免疫共沉淀进一步证实了c-Mpl与它们的相互作用.通过系列缺失研究发现两个蛋白与c-Mpl相互作用的区域都在523~554 aa范围内.用酵母双杂合系统进一步研究SGK和14-3-3蛋白之间的关系,发现两者可能直接相互作用.SGK和14-3-3蛋白可能与TPO/MPL信号传导过程中的丝氨酸/苏氨酸磷酸化有关.
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