反义CENP-B对HeLa(Tet-off)细胞增殖状况的影响  

作　　者：粱前进 王谦[1] 林海燕[1] 罗松[1] 王春梅[1] 何大澄[1] 王永潮 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室,北京100875

出　　处：《科学通报》2001年第22期1872-1876,共5页Chinese Science Bulletin

基　　金：本工作为国家重点基础研究发展规划(批准号:G1999053901);国家自然科学基金(批准号:39430080;39970361)资助项目

摘　　要：为了检测反义转染引起的细胞着丝粒蛋白CENP-B表达的变化情况,用原核表达的融合蛋白GST-CENP-B免疫Balb/c 小鼠,制得抗CENP-B的鼠抗血清（MaCenpB）.转染了含有反义CENP-B表达载体pBI-EGFP-as-CenpB的HeLa-Tet-off细胞（HaCb）,用Northern blot和Western blot研究了转染后细胞内源CENP-B基因表达的抑制情况.生长曲线表明,反义CENP-B抑制HeLa（Tet-off）细胞增殖,使倍增时间延长了32.8h.流式细胞光度术分析表明,较之HeLa（Tet-off）细胞,HaCb的G1期比例增加（△G1=9％）,S期比例减少（△S=11％）.同时,有丝分裂指数（MI）大大降低;间接免疫荧光分析表明,HaCb的着丝粒组装受到抑制.这说明,CENP-B的正常表达对于细胞的增殖是必要的.

关 键 词：着丝粒蛋白 HeLa(Tet-off)细胞 细胞分裂 细胞增殖 CENP-B 细胞周期 

分 类 号：Q25[生物学—细胞生物学]