渗透胁迫下脱水蛋白DHN1在猕猴桃细胞中表达及亚细胞分布的动态变化  

作　　者：邱全胜[1] 王泽宙[1] 蔡起贵[2] 姜荣锡[2] 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院,北京100875 [2]中国科学院植物研究所,北京100093

出　　处：《中国科学（C辑）》2001年第6期505-512,T001,共9页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39770077);国家重点基础研究发展规划(批准号:G1999011705);教育部重点科技(批准号:99133)资助项目

摘　　要：以绿色荧光蛋白（GFP）为报告分子,通过构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体,研究了渗透胁迫条件下脱水蛋白DHN1的表达及其亚细胞分布的动态变化.采用PCR方法在脱水蛋白基因dhn1两端引入XbaⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点,克隆到质粒pBIN-35S mGFP4,构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体,并采用基因枪转化猕猴桃（A.delicisoa）悬浮细胞.培养10h后观察到高效表达的GFP绿色荧光,绿色荧光只出现在细胞核内.提高培养介质渗透势后,可以诱导脱水蛋白向细胞质分布（主要集中在质膜周围）,并且增加介质渗透势可以明显缩短细胞质出现绿色荧光的时间.蛋白合成抑制剂环已亚胺能够抑制细胞质绿色荧光的出现,暗示细胞质出现的脱水蛋白是诱导产生的结果.ABA可以明显促进细胞质绿色荧光的出现,并且随着介质渗透势的升高迅速缩短细胞质绿色荧光的出现时间.

关 键 词：猕猴桃 悬浮细胞 渗透胁迫 脱水蛋白DHN1 绿色荧光蛋白 亚细胞分布 基因表达 逆境生理 

分 类 号：Q945.78[生物学—植物学]