原位杂交分子组织化学技术及其在电镜技术中的应用  

作　　者：胡礼振[1] 郭勇[1] 吴绍华[1] 

机构地区：[1]泸州医学院,泸州646000

出　　处：《四川解剖学杂志》1997年第1期62-63,共2页Sichuan Journal of Anatomy

摘　　要：研究细胞或组织内特殊基因表达的调控机理，分析单细胞内蛋白质和mRNA的特殊基因表现很有必要。原位杂交对于发现mRNA是必不可缺少的方法，它不但可以分析特殊mRNA的表达，而且可以证实特殊蛋白质的合成部位。原位杂交取决于细胞或组织内靶核酸与核酸探针的碱基配对，且条件尽可能优化。作为核酸探针，人工合成的01igo-DNA颇受青睐，且在诸多方面优于克隆双链CDNA。应用01igo-DNA探针可在组织切片上清楚地将28srRNA定位于细胞核或细胞质部位。原位杂交28srRNA对于评价切片中可杂交的rRNA水平十分方便。随着计算机图象分析广泛应用和酶免疫组织化学技术半抗原探针的问世，非放射性比色测定染色法也在所进步，借助显微照相与图象分析仪可以定量检测各种染色密度，或借助于扫描电镜技术背散电子探针以显示特殊的mRNA的位置。原位杂交非放射法最佳优点是它的高分辨率。这使人们可以在细胞和亚细胞水平分析mRNA的分布。事实上，应用此法研究mR－NA不规则分布方面已有明显进步。如将actinmRNA定位于细胞质；乙酸胆碱脂酶的mRNA仅限于核周区，而此种酶被输送到特定的细胞膜部位；胃泌素mRNA仅限于人胃泌素细胞的核上区，而翻译了的胃泌素蛋白质则被输送到细胞的基底部；

关 键 词：原位杂交 分子组织化学技术 电镜技术 应用 

分 类 号：R329－33[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] Q－336[医药卫生—基础医学]