氨甲喋呤对映体体外诱导BALL-1和CCRF-CEM细胞系蛋白质表达差异  

作　　者：陈洋[1] 王慧茹 沈佐君 

机构地区：[1]中国科学技术大学附属第一医院输血科,合肥230001 [2]中国科学技术大学附属第一医院科研处,合肥230001

出　　处：《临床检验杂志》2018年第11期850-853,共4页Chinese Journal of Clinical Laboratory Science

基　　金：安徽省自然科学基金(1708085QH198)

摘　　要：目的探讨氨甲喋呤对映体(methotrexate,MTX)体外诱导急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞系BALL-1和CCRF-CEM蛋白质表达的差异性。方法通过浓度递增及低剂量持续性诱导构建耐受30μmol MTX对映体[L-(+)-MTX和D-(-)-MTX]的CCRF-CEM和BALL-1细胞系。提取耐药细胞、非耐药细胞及不加药时两种细胞的总蛋白质,利用双向凝胶电泳技术获得亲本细胞和耐药细胞的电泳结果,选择差异倍数在2倍以上且边界比较清晰的蛋白质点,经胶内原位酶解,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定肽质量指纹图(PMF),将所得的结果进行生物学信息分析。结果共发现12个蛋白质点有生物学功能,包括4个热休克相关蛋白(HPSA5、HPSA8、HSPD1和DNAJA1/4)、5个与细胞增殖有关联的蛋白质(PCNA、NPM1、CORO1A、CALR和DYNC1I2)以及2个分子伴侣相关蛋白(CCT6A/B和VCP),另1个蛋白质为EON1/2,并证实其与细胞的新陈代谢有关联。结论 MTX对映体诱导耐药后细胞系蛋白质表达发生变化,可能在耐药过程中具有重要的作用。

关 键 词：MTX对映体 BALL-1 CCRF-CEM 双向电泳 

分 类 号：R446[医药卫生—诊断学] R733.71[医药卫生—临床医学]