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机构地区:[1]中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室,北京100080
出 处:《科学通报》2002年第5期361-365,共5页Chinese Science Bulletin
基 金:本工作为国家自然科学基金(批准号:3970009);国家杰出青年基金(批准号:39925001);中国科学院知识创新工程(批准号:KXCXZ-3-01-02)资助项目。
摘 要:芝田硫化叶菌(Sulfolobus shibatae)是一种极端嗜热古菌,其所携带的温和病毒SSV1是研究古菌DNA复制的一个非常合适的系统.杂交分析表明,静置培养时,芝田硫化叶菌细胞内几乎检测不到游离SSV1 DNA,病毒 DNA主要以整合状态存在.经紫外或丝裂霉素诱导后,细胞内游离SSV1 DNA含量明显增加,但整合SSV1 DNA拷贝数不变.丝裂霉素诱导作用的重复性明显高于紫外诱导.另外,当细胞由静置培养改为摇床培养时,SSV1 DNA也被诱导复制.据此,建立了 SSV1 DNA复制的丝裂霉素诱导方法.采用此法,芝田硫化叶菌细胞内游离 SSV1 DNA含量在诱导后 10h开始明显增加,并在12~15h达到最大值.诱导后细胞内游离病毒 DNA的拷贝数可达到 50.上述诱导方法的建立以及对诱导后SSV1 DNA复制行为的描述为确定 SSV1病毒 DNA的复制原点、分析其复制模式奠定了基础.
关 键 词:极端嗜热古菌 芝田硫化叶菌 SSV1病毒 DNA 复制 诱导
分 类 号:S432.41[农业科学—植物病理学]
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