白芷细胞外ECBP21全长cDNA克隆  

作　　者：毛国红[1] 汤文强[1] 郭毅[1] 丁存宝[1] 孙大业[1] 周人纲 

机构地区：[1]河北师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究室,石家庄050016 [2]河北农业科学院农业物理生理生化研究所,石家庄050051

出　　处：《科学通报》2002年第9期689-692,共4页Chinese Science Bulletin

基　　金：本工作为国家重点基础研究发展规划(批准号:G19990117);国家自然科学基金(批准号:30170476)资助项目.

摘　　要：ECBP21是从白芷悬浮培养细胞外检测并纯化的一种依赖钙的钙调素结合蛋白.利用RT-PCR和5’-RACE方法,获得其CDNA全长.ECBP21 cDNA全长947 bp,编码216个氨基酸,其中N端1～25氨基酸为信号肽,26～216氨基酸为成熟蛋白肽段,而且26～45氨基酸序列与纯化ECBP21末端测序结果完全一致.将此cDNA成熟蛋白编码区核苷酸片段导入pET-28b（+）表达载体中,并在大肠杆菌表达系统中诱导表达,经CaM-Geloveriay检测证实表达蛋白具有Ca2+依赖的钙调素结合特性,从而进一步证实了cDNA克隆的正确性.这为进一步用分子生物学方法研究植物细胞外多肽ECBP21的生物学功能奠定了基础.

关 键 词：细胞外钙调素结合蛋白 ECBP21 CDNA克隆 蛋白表达 白芷 分子生物学 基因克降 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学] Q943.2