TNFα基因在小鼠成纤维细胞L929中的调控研究  

The Regulation Effect of TNFα Gene in Murine Fibroblast L929

作　　者：林丽珠[1] 唐炯[1] 喻红[1] 黄莉[1] 赵寿元[1] 李昌本[1] 

机构地区：[1]复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海200433

出　　处：《复旦学报（自然科学版）》2002年第1期47-51,共5页Journal of Fudan University：Natural Science

基　　金：国家"攀登"计划资助项目

摘　　要：质粒pEGFP 1是一种不含启动子序列的哺乳动物细胞表达载体 .将系列缺失的TNFα基因启动子、5′UTR(untranslatedregion)和 3′UTR插入 pEGFP 1中 ,构建了一组重组质粒 .转染L92 9细胞后 ,发现当报告基因EGFP的上游含有包括 5′UTR在内的TNFα基因启动子序列时 ,重组质粒在L92 9细胞中均能表达EGFP .但是 ,当EGFP基因 3′端同时含有TNFα基因的 3′UTR时 ,重组质粒转染L92 9细胞后 ,均不能表达EGFP .因此 ,在L92 9细胞中 ,TNFα基因的 3′UTR对基因表达具有抑制作用 .进一步研究发现 ,在L92 9细胞中 ,TNFα基因的 3′UTR对基因表达的抑制作用需要其 5′UTR的共同参与 ,而且 ,RT PCR实验表明 ,LPS在其他细胞中对TNFα表达起诱导作用的机制在L92Plasmid pEGFP 1 is a mammalian cell expression vector whose reporter gene lacks its own promoter sequence. A series of constructs consisting of EGFP report gene flanked by the TNFα promoter,5′ untranslated region (UTR) and 3′UTR were constucted. After transient transfection of the constructs containing the TNFα promoter sequence including 5′UTR, EGFP gene is constitutively expressed in L929 cells, but EGFP gene become inactive by the insertion of the 3′UTR into the 3′end of EGFP report gene. The results suggested the inhibitory effect of the 3′UTR of TNFα gene on gene expression in L929 cells. The inhibitory effect of 3′UTR of TNFα gene on gene expression in L929 cells needs in synergy with its 5′UTR. Furthermore, the activation effect of lipopolysaccharide (LPS) on TNFα gene expression is absent in L929 cells detected by RT PCR analysis.

关 键 词：TNFα基因调控 绿色荧光蛋白 L929细胞 成纤维细胞 

分 类 号：Q753[生物学—分子生物学]