沙眼衣原体热休克蛋白60抗原基因的克隆和表达  

Cloning and Expression of Heat Shock Protein 60 Gene from Chlamydia trachomatis

作　　者：栗玉珍[1] 尚红[2] 孙峥嵘[2] 姜拥军[2] 

机构地区：[1]哈尔滨医科大学附属第二医院皮肤科 [2]中国医科大学附属第一临床学院P3实验室,沈阳110001

出　　处：《中华皮肤科杂志》2002年第3期206-208,共3页Chinese Journal of Dermatology

基　　金：中国-欧盟性病/艾滋病防治合作项目

摘　　要：目的对沙眼衣原体热休克蛋白60(Chsp60)进行表达和纯化,以获得高纯度的蛋白抗原。方法应用PCR扩增技术分离Chsp60的基因全长,采用基因工程的方法,应用融合表达载体重组、克隆得到Chsp60特异抗原基因的重组菌株,经诱导表达获得重组融合蛋白,并经亲和层析获得纯品。结果得到了热休克蛋白60重组克隆菌株,成功地诱导表达并纯化了相对分子质量为87000的融合蛋白,纯度达90%以上,产量为2.5mg/L。结论获得的相对分子质量为60000的特异性抗原可用于检测衣原体感染患者血清中的抗体,有助于探讨Chsp60在免疫发病中的作用。ObjectiveToexpressandpurifychlamydialheatshockprotein60(Chsp60).MethodsChsp60wasamplifiedfromthecompletegenomebyPCR,andclonedinthepGEX-2Tfusedexpressionvector.AftertransformedintoE.ColiJM109,thefusionproteinwasgeneratedbyE.colifusedexpressionsystemandpurifiedwithaffinitychromatography.ResultsArecombinantplasmidcontainingChsp60antigencDNAwasobtainedfromChlymadialtrachomatis,this87kDfusionproteinwassuccessfullyexpressedandpurified.Fusionproteinwaspu-rifiedto>90%inasinglestep,andtheproteinyieldwas2.5mg/L.ConclusionPurifiedChsp60kDantigenisobtained,andtheantigenmightbeappliedtodetectantibodyinpatientsinfectedwithChlamydialtrachomatis,andwillcontributetostudytheroleofChsp60inimmunopathogenesis.

关 键 词：沙眼衣原体 监控蛋白60 重组融合蛋白质类 表达 

分 类 号：R759[医药卫生—皮肤病学与性病学]