利用RNA沉默抑制子HC-Pro提高基因表达的策略  

Study of Increasing Gene Expression by RNA Silencing Suppressor HC-Pro

作　　者：金太成[1] 张奇[2] 赵卓[1] 杨丽萍[1] 

机构地区：[1]吉林师范大学生命科学学院,四平136000 [2]南京农业大学生命科学学院,南京210095

出　　处：《农业生物技术学报》2014年第7期870-875,共6页Journal of Agricultural Biotechnology

基　　金：吉林省科技发展计划青年科研基金项目(No.20130522182JH);国家青年科学基金项目(No.31301043)

摘　　要：利用植物生物反应器生产药用蛋白具有独特的发展优势,但外源基因在受体内会发生基因沉默现象而影响基因的表达。由于基因沉默抑制子能有效抑制外源基因的沉默反应,本研究利用沉默抑制子蚜传辅助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)转基因烟草有效提高了外源基因的表达。采用叶片注射法将携带表达载体p35S-30B-GFP的农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)重悬液分别侵染野生型烟草(Nicotiana bentamiana)和HC-Pro转基因烟草(N.bentamiana),通过蛋白电泳检测和Western blot检测技术对绿色荧光蛋白(GFP)表达进行比较。研究结果表明,与野生型烟草Nb相比,HC-Pro转基因烟草中GFP的表达水平显著增加。本研究为基因沉默抑制子在植物生物反应器中的应用提供了理论依据。Using plants bioreactor to produce pharmaceutical proteins has special development advantages,however,foreign gene silencing usually affecte gene expression.Since gene silencing suppressor can effectively inhibit the gene silencing,we focused on using gene silencing suppressor helper componentproteinase （HC-Pro） to improve gene expression.The results showed that green fluorescent protein （GFP） expressed in Nicotiana benthamiana plants by leaf infection of Agrobacterium suspension containing p35S-30B-GFP vector.Compared with the wild type tobacco Nb,the expression level of GFP significantly increased in HC-Pro transgenic tobacco analyzed by protein electrophoresis and Western blot.The results provide the basis for gene silencing suppressor applied in plant bioreactor.

关 键 词：瞬时表达 基因沉默抑制子 蚜传辅助因子(HC-Pro) 绿色荧光蛋白(GFP) 

分 类 号：S432.41[农业科学—植物病理学]