生物素标记奶牛冷冻精子膜蛋白的提取、纯化与初步鉴定  

作　　者：张思哲[1] 郭洪香[1] 蒋静思[1] 张莉[1] 薛立群[1] 王乃东[1] 

机构地区：[1]湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128

出　　处：《中国畜牧兽医文摘》2014年第6期48-50,共3页

基　　金：国家自然科学基金(No.30901090/C120209);湖南省教育厅科学研究优秀青年项目(No.09B046);湖南省研究生创新基金项目资助(No.CX2009B154)

摘　　要：本文通过利用膜不透性的生物素试剂Sulfo-NHS-SS-Biotin原位标记完整的奶牛精子细胞表面蛋白质,通过验证生物素与精子细胞表面的特异性结合,然后裂解细胞,用中性亲和素琼脂糖树脂纯化生物素化的蛋白质。最后用TCA浓缩膜蛋白。实验结果表明生物素特异的与精子细胞表面膜蛋白结合,通过中性亲和素琼脂糖树脂纯化出来的膜蛋白浓度较低,通过TCA蛋白浓缩后,膜蛋白浓度有了明显提升。建立了奶牛精子膜蛋白的生物素标记验证体系,通过提取、亲和纯化、TCA浓缩等步骤成功的得到了较高浓度的奶牛精子膜蛋白。

关 键 词：奶牛 精子膜蛋白 提取 

分 类 号：S858.28[农业科学—临床兽医学]