小鼠肝炎病毒A59毒株结构蛋白基因的克隆  

作　　者：陈晓娟[1] 卫振[1] 刘迪文[1] 

机构地区：[1]浙江大学实验动物中心,浙江杭州310058

出　　处：《畜牧与兽医》2014年第8期80-82,共3页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

摘　　要：为获得小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)结构蛋白基因S1、S2、M及N,分别构建了4个重组质粒。依据GenBank公布的MHV A59毒株RNA全序列设计4对特异性引物,以A59 RNA反转录得到的cDNA为模板,通过PCR扩增出S1、S2、M及N这3个结构蛋白基因的4个片段,分别将其通过A-T连接入pMD-20 T载体后,双酶切鉴定正确后,送出测序确认。将测序结果与GenBank序列比对,确认扩增得到的S1、S2、M及N的核酸序列与其相似度分别为100%,99%,100%和99%。试验成功扩增出S1、S2、M及N的核酸序列,其构建的重组质粒可以作为检测MHV的阳性对照,为建立RT-PCR快速检测试验小鼠MHV的方法提供生物材料。

关 键 词：小鼠肝炎病毒 RT-PCR 克隆 

分 类 号：S852.6[农业科学—基础兽医学]