HEV ORF3 cDNA序列分析及在HepG2细胞的表达  

DNA sequencing of HEV ORF3 cDNA and expression in HepG2 cell

作　　者：赵振宇[1] 温雯静[1] 刘新胜[1] 赵江波[2] 刘晓东[3] 

机构地区：[1]漯河医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室,河南漯河462002 [2]江苏大学附属医院内分泌科,江苏镇江212001 [3]漯河医学高等专科学校人体解剖学教研室,河南漯河462002

出　　处：《重庆医学》2014年第23期3034-3036,共3页Chongqing medicine

基　　金：河南省教育厅自然科学研究计划项目(2010C310005)

摘　　要：目的对构建的HEV新疆株ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA序列分析,并转染HepG2细胞进行表达,为进一步探索ORF3蛋白功能提供基础。方法对HEV ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA测序,分析ORF3蛋白一级结构,脂质体介导法转染HepG2细胞,用免疫荧光法鉴定ORF3蛋白的表达及细胞内定位。结果 HEV新疆株ORF3蛋白具有保守的PPLP基序,转染HepG2细胞后经免疫荧光鉴定能在细胞内表达。结论构建出HEV ORF3蛋白真核表达重组载体,并能在HepG2细胞表达,为进一步研究HEV ORF3蛋白的功能提供了实验基础。Objective To analysis the DNA sequence of HEV ORF3 cDNA and express in HepG2 cell.Methods Recombinant vector carrying HEV ORF3 cDNA was constructed and identified by DNA sequencing.Expression of recombinant vector in HepG2 cell was determined by immunofluorescence technique.Results The recombinant vector was constructed and expressed in HepG2 cell successfully.Conclusion The research laid experimental foundation for exploring the biological function of ORF3 protein in the pathogenesis of viral hepatitis E.

关 键 词：戊型肝炎病毒 开放读码框架 表达载体 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学] R346[医药卫生—基础医学]