西伯利亚杏SRAP-PCR反应体系的优化研究  

Optimization of SRAP-PCR system with orthogonal design in Prunus sibirica

作　　者：李爽[1] 董胜君[1] 吴月亮[1] 余海滨[1] 刘明国[1] 

机构地区：[1]沈阳农业大学林学院,辽宁沈阳110161

出　　处：《辽宁林业科技》2014年第4期9-11,共3页Liaoning Forestry Science and Technology

基　　金：国家林业公益性行业科研专项(201004034);中央财政林业科技推广示范资金项目([2010]02)

摘　　要：以西伯利亚杏为试验材料,进行基因组DNA的提取、扩增及电泳试验。通过L16(45)正交试验,确定西伯利亚杏SRAP-PCR优化反应体系(反应体系总体积20μL):Mg2+2.0 mmol·L-1、dNTPs0.25 mmol·L-1、引物浓度1.2μmol·L-1、Taq聚合酶1.0 U、DNA模板20 ng。采用SRAP引物组合ME5/EM10,对优化的SRAP-PCR反应体系进行初步验证,24个西伯利亚杏无性系SRAP分子标记试验共扩增出谱带431条,引物扩增出23条谱带,其中338条为多态性谱带,多态百分率为78.42%。With Prumts sibirica, genomic DNA extraction, amplification and electrophoresis tests were conducted. The optimal reac- tion system （20μL ） of SRAP markers were as follows： 2.0 mmol·L-1 of Mg2＋, 0.25 mmol· L-1 of dNTPs, 1.2μmol·L-1 of primer, 1.0U ofTaq DNApolymerase, 20.0 ng of DNA template. Using primer combination ME5/EM10, preliminary verification of the optimal SRAP-PCR system was carried, 24 Prunus sibirica clones from different provenances as samples, 431 loci were amplified, and a couple of primer amplified 23 loci. 338 loci were polymorphic, accounting for 78.42% of the total loci.

关 键 词：西伯利亚杏 SRAP—PCR反应体系 优化 

分 类 号：S662.2[农业科学—果树学]