CKLF1通过激活PLCγ/FAK信号途径促进SH-SY5 Y细胞迁移  

CKLF1 induces SH-SY5Y cell migration via PLCγ/FAK signaling pathway

作　　者：王真真 苑玉和 韩宁 张毅[2] 陈乃宏 

机构地区：[1]中国医学科学院神经科学中心中国医学科学院·北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室,北京100050 [2]北京中医药大学基础医学院解剖学教研室,北京100029

出　　处：《中国药理学通报》2014年第9期1209-1213,共5页Chinese Pharmacological Bulletin

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 81274122、81102831、81173578、81202507、81373997、81202939);国家科技部“重大新药创制”科技重大专项(No 2012ZX09301002-004、2012ZX09103101-006);国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(No2012AA020303);教育部长江学者和创新团队发展计划(PCSIRT)(No IRT1007);教育部博士点基金重点项目(No 20121106130001);北京市自然科学基金资助项目(No 7131013、7142115);新药作用机制研究与药效评价北京市重点实验室资助项目(NoBZ0150);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(No 2014RC03)

摘　　要：目的考察趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)对神经系统细胞系SH-SY5Y细胞迁移运动的影响,并进一步研究其分子机制。方法采用CELLocate细胞定位法研究CKLF1在不同时间点对SH-SY5Y细胞迁移的影响;采用蛋白免疫印迹法观察CKLF1是否能够增强与细胞迁移密切相关的局部粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)Tyr-397位点的磷酸化水平,并进一步研究抑制FAK上游分子PLCγ对这一作用的影响;采用Boyden趋化小室法观察抑制FAK或PLCγ对CKLF1趋化活性的影响。结果 CKLF1对SH-SY5Y细胞具有趋化作用,能够诱导其迁移运动,并能明显增强FAK-pY397位点的磷酸化水平,而加入PLCγ抑制剂U73122则减弱了CKLF1诱导的FAK磷酸化水平的升高。此外,FAK抑制剂PF-573228和PLCγ抑制剂U73122均可明显抑制CKLF1的趋化活性。结论趋化因子CKLF1能够通过激活PLCγ/FAK信号途径,促进SHSY5Y细胞的迁移运动。Aim To investigate the role of chemokine-like factor 1 （ CKLF1 ） in SH-SY5 Y cell migration and its molecular regulatory mechanism. Methods SH-SY5Y cells were stimulated with CKLF1 for 0. 5 h, 2 h, 8 h and 24 h, respectively. The migration distance and the percentage of migration cells were recorded by CELLocate analysis. The phosphorylation of focal ad-hesion kinase （ FAK） at Tyr-397 site was detected by Western blot analysis. By chemotaxis assays, we con-firmed the chemotaxis of CKLF1. Furthermore, FAK inhibitor PF-573228 and PLCγ inhibitor U73122 were used for the research of molecular regulatory mecha-nisms involved. Results CKLF1 promoted cell migra-tion and induced a strong increase in the phosphoryla-tion level of FAK-pY397 , which were significantly at-tenuated by the presence of U73122 （ a specific inhibi-tor for PLCγ） . In addition, the chemotaxis of CKLF1 was obviously blocked by the FAK inhibitor PF-573228 . Conclusion CKLF1 induces SH-SY5 Y cell migration via PLCγ/FAK signaling pathway.

关 键 词：CKLF1 细胞迁移 FAK PLCγ CELLocate SH-SY5Y 

分 类 号：R322.81[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R329.24[医药卫生—基础医学]