蓝舌病病毒一步RT-PCR检测方法的建立  

Development of one-step RT-PCR method for the detection of bluetongue virus

作　　者：冯瑜菲[1,2] 赵国辉[2] 徐青元[2] 杨涛[2] 孙恩成[2] 李俊平[2] 吴东来[1,2] 

机构地区：[1]东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001

出　　处：《中国预防兽医学报》2014年第9期712-714,共3页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(030201310)

摘　　要：为建立蓝舌病病毒（BTV）群特异性核酸检测方法,本研究针对BTV S10基因保守区域设计并合成1对特异性引物,建立了一步RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测.实验结果表明：该方法对BTV1～24型均有特异性反应,而对茨城病毒（IBAV）、中山病毒（CV）和赤羽病病毒（AKAV）无交叉反应,具有良好的特异性;最低检出量为102 TCID50/mL.此外,该方法能有效的从羊的抗凝血样品中检测出BTV核酸.本研究所建立的一步RT-PCR检测方法可以用于BTV的快速检测及流行病学调查.To establish the assay for detecting bluetongue virus （BTV）, one-step RT-PCR assay was developed with a pair of group specific primers targeting the sequence of BTV S10 gene for the detection of BTV from serotype 1 to 24. The test results showed that the one-step RT-PCR was specific for detection the serotype 1 to 24 of BTV with a detection limit of 102 TCID50/mL, but no cross amplification for IBAV, CV and AKAV. In addition, this assay was capable to detect BTV from the clinical blood sample of sheep. These results demonstrated the established one-step RT-PCR had the potential for the rapid detection and epidemic surveys of BTV.

关 键 词：蓝舌病病毒 分子诊断 BLUETONGUE VIRUS (BTV) 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]