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作 者:黄浅[1,2] 赖钟雄[1] 赖呈纯[1] 顾金玲[1] 吴金寿[1]
机构地区:[1]福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州350002 [2]周口市农业科学院,河南周口466001
出 处:《福建农林大学学报(自然科学版)》2014年第4期361-368,共8页Journal of Fujian Agriculture and Forestry University:Natural Science Edition
基 金:福建省农业科技平台(2008N2001);国家教育部霍英东教育基金会高等学校青年教师基金项目(71026);国家自然科学基金项目(39870544)
摘 要:以荔枝转基因原生质体再生的胚性愈伤组织(TPEC)细胞系和龙眼‘红核子’品种的松散型胚性愈伤组织(EC)为材料,采用PA-4000电融合仪进行原生质体电融合参数的研究.结果表明:荔枝TPEC与龙眼EC原生质体融合的适宜电融合参数为原生质体密度5×105个·mL-1,交流电场频率1.0 MHz、交变电场场强50 V·cm-1,作用时间60 s,直流脉冲强度600 V·cm-1、脉冲持续时间10 ms,脉冲2-3次.在此条件下,融合率可达30%以上.Litchi embryogenic callus derived from transgenic protoplasts (TPEC) and longan embryogenic callus (EC) were used as the material,the protoplast electrofusion parameters were studied by means of Cyto pulse PA-4000 cell electrofusion apparatus.The results showed that the suitable fusion parameters between the protoplasts from TPEC in litchi and the friable embryogenic calli in longan were as follows:the protoplast density of 5 × 10^5 protoplasts · mL-1,1.0 MHz AC frequency and 50 V· cm-1 AC voltage for 60 s,600 V · cm-1 DC strength for 10 ms,the pulse for 2-3 times.The rate of the protoplast fusion reached more than 30%.
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