荷花ISSR引物筛选及反应体系优化  

作　　者：徐君[1] 李静会[1] 李欣[1] 姜红卫[1] 

机构地区：[1]江苏太湖地区农业科学研究所,江苏苏州215155

出　　处：《江苏农业科学》2014年第10期42-44,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(12)5075]

摘　　要：利用加拿大哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物,以2个荷花品种的DNA为模板进行PCR扩增。采用单因素试验方法对荷花ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、引物、dNTP、模板DNA、Taq酶)进行浓度优化,确定了荷花ISSR反应的25μL最佳扩增体系为:10×Taq Buffer 2.5μL,Mg2+3.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物1.0μmol/L,Taq酶1.00 U,模板DNA 40 ng。筛选出8条扩增条带较好的ISSR引物,并对其引物进行梯度PCR试验,筛选出各引物对应的最佳退火温度,扩增共计获得61条ISSR条带。

关 键 词：荷花 ISSR 引物筛选 体系优化 

分 类 号：S682.320.1[农业科学—观赏园艺]