农杆菌介导的玉米愈伤组织遗传转化影响因子和植株再生条件  

作　　者：张莹莹[1] 吴连成[1] 张赛赛[1] 安允权 崔新建[1] 陈彦惠[1] 

机构地区：[1]河南农业大学/河南粮食作物协同创新中心,河南郑州450002

出　　处：《江苏农业科学》2014年第11期51-54,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家转基因重大专项(编号:2008ZX08003-001);河南省现代农业产业技术体系(编号:S2010-02)

摘　　要：以HiⅡ、HiⅡB、HiⅡA、H99玉米材料的幼胚诱导的胚性愈伤为转化受体，利用农杆菌介导转化的方法，将抗粗缩病RNA干扰基因导入玉米愈伤组织，并对影响转化的因素进行研究，以优化遗传转化体系。结果表明：继代3次的4种玉米材料的抗性愈伤率最高，且不同品种间存在差异，HiⅡ的抗性愈伤率最高，为31．25％，其次为HiⅡB（26．56％）、HiⅡA（24．45％），H99的抗性愈伤率最低，仅为10．26％；预培养6d的愈伤组织适于转化，其中HiⅡ的抗性愈伤率最高，为27．70％；结果还表明，菌液浓度D600nm=0．5-0．6是最佳的转化条件。通过优化后的条件对得到的抗性愈伤用除草剂进行筛选，HiⅡ、陇ⅡB、HiⅡA、H99材料分别得到10、5、4、3块抗性愈伤组织；标记基因为bar基因，通过PCR检测分别得到5、2、2、1块阳性愈伤组织，再进一步用bar基因试纸条检测，分别得到4、1、2、1株阳性植株。

关 键 词：农杆菌介导法 遗传转化 植株再生 抗性愈伤 BAR基因 

分 类 号：Q943.2[生物学—植物学] S513.03[农业科学—作物学]