nptⅡ::gfp在锦橙遗传转化中转化效率的研究  被引量:1

Transformation Efficiency of nptⅡ::gfp Fusion Gene in Jincheng Orange

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作  者:何丹丹[1,2] 邹修平 解栋梁 彭爱红 许兰珍 何永睿 陈善春 

机构地区:[1]西南大学园艺园林学院,重庆400716 [2]中国农业科学院柑桔研究所/西南大学柑桔研究所,国家柑桔品种改良中心

出  处:《中国南方果树》2014年第6期1-4,23,共5页South China Fruits

基  金:中央高校基本科研业务费专项(XDJK2014A018);国家科技支撑计划课题任务书(2012BAD19B06);重庆应用开发项目(CSTC2013yykfA8002);柑桔学重庆市市级重点实验室开放基金计划项目(CKLC201105)资助

摘  要:绿色荧光蛋白基因(gfp)和新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)被广泛应用于植物的遗传转化中。为了研究融合标记基因nptⅡ::gfp在锦橙遗传转化中的转化效率,经农杆菌介导法将CaMV35s组成型启动子驱动的nptⅡ::gfp融合标记基因表达载体pNGM和由CaMV35s启动子分别驱动nptⅡ、gfp两个基因的表达载体pNPTⅡ-GF转化至锦橙上胚轴内。GFP绿色荧光检测结果显示,gfp在转nptⅡ::gfp融合基因植株中强烈表达,荧光强度与转非融合nptⅡ和gfp基因植株的表达水平相当。nptⅡ::gfp融合标记基因在锦橙上的转化效率为10.8%,与非融合nptⅡ和gfp基因的转化效率(11.0%)无明显差异。nptⅡ::gfp融合标记基因是一个有效的锦橙遗传转化筛选标记基因。Green fluorescent protein(GFP)gene and neomycin phosphoric acid transferase(NPTⅡ)gene have been widely used in plant genetic transformation.In order to investigate the genetic transformation efficiency of nptⅡ::gfpfusion gene in citrus,Agrobactirum-mediated genetic transformation of Jincheng orange(Citrus sinensis)with the pNGM vector containing the nptⅡ::gfpfusion gene under the control of CaMV35 spromoter,using the pNPTⅡ-GF vector containing both nptⅡ gene and gfpgene as a control was established.Results showed that GFP expressed strongly in the fusion gene nptⅡ::gfptransformed plants.The transformation efficiency of nptⅡ::gfpfusion gene was 10.8%,same as that(11.0%)of nptⅡ gene.The results revealed that the fusion gene nptⅡ::gfpis an effective selectable marker gene for Jincheng orange genetic transformation.

关 键 词:nptⅡ::gfp融合标记基因 遗传转化 转化效率 锦橙 

分 类 号:S666[农业科学—果树学]

 

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