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作 者:付海京[1,2] 王锐[1,2] 陈一天[1,2] 张群[1,2] 孙茜[1,2] 黄小银[1,2] 管晓翔[1,2] 王靖华[1,2] 陈龙邦[1,2]
机构地区:[1]南京大学医学院临床学院 [2]南京军区南京总医院(金陵医院)肿瘤内科,江苏南京210002
出 处:《南京医科大学学报(自然科学版)》2014年第11期1503-1506,共4页Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences)
基 金:国家自然科学基金(81272734;81372588)
摘 要:目的 :转移相关基因1(metastasis associated 1,MTA1)已知与肿瘤转移密切相关,且与胃癌恶性程度明显相关,并可以通过影响信号转导途径发挥其功能,本研究拟确定MTA1是否可以被泛素化途径所调控。方法:以蛋白酶体抑制剂MG-132处理胃癌细胞后,以IP/WB实验检测MTA1的表达水平,并将带Myc标签的MTA1质粒以及带HA标签的泛素(HA-Ub)质粒转入该细胞,检测Myc-MTA1的表达。结果:以蛋白酶体抑制剂MG-132处理胃癌细胞MKN-45、SGC-7901后,MTA1表达水平显著增加;免疫共沉淀实验显示泛素分子可以与MTA1直接结合,并且实验组较对照组相比泛素化程度明显增加;将HEK293细胞以si MTA1处理封闭MTA1的表达后,将Myc-MTA1质粒以及HA-Ub质粒转入该细胞,发现当后者存在时Myc-MTA1可被强烈泛素化。结论:在胃癌细胞中MTA1是可被泛素化途径修饰的蛋白。Objective:Metastasis associated 1(MTA1)is a protein closely related to the malignant degree of gastric cancer. We try to prove that MTA1 can be regulated by the ubiquitin pathway in this study. Methods:After the proteasome inhibitor MG-132 treatment in gastric cancer cells,the expression level of MTA1 was detected though IP / WB. MTA1 expressing plasmid containing the Myc tag and HAtagged ubiquitin plasmid(HA-Ub) were co-transfected into cells,and the expression of Myc-MTA1 was detected.Results:After treatment with MG-132,the protein level of MTA1 in gastric carcinoma cell line SGC-7901 increased significantly.Myc-MTA1 was strongly ubiquitinated by HA-Ub in HEK293 cells. Conclusion:MTA1 in human gastric cancer cells can be regulated through ubiquitination pathway.
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