利用药物印迹法筛选化学杂交剂苯哒嗪靶标蛋白基因  

Screening targe t-prote in gene of chemical hybridizing agent clofencet by drug-western method

作　　者：赵新亮[1,2] 张改生[1] 宋瑜龙[1] 李志宽[1] 朱启迪[1] 赵卓军[1] 马守才[1] 王军卫[1] 牛娜[1] 

机构地区：[1]西北农林科技大学/国家杨凌农业生物技术育种中心/国家小麦改良中心杨凌分中心/小麦育种教育部工程研究中心/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室,陕西杨凌712100 [2]河南科技学院生命科技学院,河南新乡453003

出　　处：《农药学学报》2014年第6期713-719,共7页Chinese Journal of Pesticide Science

基　　金：国家高技术研究发展计划("863"计划)重大专项(2011AA10A106);国家自然科学基金项目(31171611;31371697);陕西省"13115"科技创新工程与科技统筹重大科技专项(2010ZDKG-68;2014KTZB02-01-02)

摘　　要：为了筛选化学杂交剂苯哒嗪的靶标蛋白基因,以SQ-1(15%苯哒嗪乳油)处理的小麦品种西农1376为材料,以噬菌体λTripl Ex2为载体,利用SMART技术构建小麦单核期花药c DNA表达文库;以生物素为报告基团,合成苯哒嗪小分子探针,并利用该探针在c DNA表达文库中进行苯哒嗪靶标蛋白基因筛选。结果成功构建了一种新型有效的药物印迹筛选方法,获得了一条能够与苯哒嗪结合的蛋白基因c DNA序列,其编码蛋白属于DUF3456家族。研究结果为进一步明确SQ-1(有效成分苯哒嗪)的作用机理提供了依据。In order to select the target gene of chemical hybridizing agent clofencet,the c DNA expression library of uninucleate-stage anther from w heat varieties Xinong 1376 treated w ith SQ-1（ 15% clofencet EC） was constructed by SMART technology using the carrier phage λ Tripl Ex2. The clofencet target genes w ere screened by a synthetic small molecule probes w ith a reporter group biotin.A novel method for effective drug screening blots w as set up,and a target gene of clofencet w as obtained,w hich encoded a protein belongs to the DUF3456 family. The results provided basis forfurther study on the mechanisms of SQ-1（ the active ingredient of clofencet）.

关 键 词：小麦 化学杂交剂 SQ-1 苯哒嗪 药物印迹 cDNA表达文库 靶标蛋白基因 

分 类 号：S482.99[农业科学—农药学]