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作 者:蒋杞英[1] 张智[1] 王明丽[1] 马远方[1]
机构地区:[1]河南大学医学院细胞与分子免疫学重点实验室,开封475004
出 处:《中国免疫学杂志》2014年第12期1601-1605,共5页Chinese Journal of Immunology
基 金:国家自然科学基金(30971508)
摘 要:目的:探讨热休克转录因子1(Heat shock transcription factor 1,Hsf1)对人肝癌细胞株PLC/PRF5生长的调控作用。方法:通过shRNA基因沉默技术,构建Hsf1基因沉默的PLC/PRF5肝癌细胞株。采用Western blot检测PLC/PRF5肝癌细胞Hsf1、p53和Rb蛋白的表达。通过四甲基偶氮唑盐(Methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT)法、平板克隆实验和细胞周期的检测,观察PLC/PRF5细胞株的增殖情况。结果:shRNA-Hsf1能有效地沉默Hsf1在PLC/PRF5细胞中的表达;shRNAHsf1能有效阻滞细胞周期于G1期,抑制PLC/PRF5细胞的生长速度和细胞克隆形成率;Hsf1基因沉默可上调PLC/PRF5细胞p53和Rb蛋白的表达。结论:Hsf1基因沉默可通过上调p53和Rb蛋白的表达抑制肝癌细胞株PLC/PRF5的增殖。Objective:To explore the regulatory effect of Hsf 1 on PLC/PRF5 hepatoma cells proliferation.Methods: By shRNA gene silencing technology ,constructed PLC/PRF5 hepatoma cell line of Hsf 1 gene silencing.To detect the expression of Hsf 1, p53 and Rb proteins in PLC/PRF5 hepatoma cells by Western blot.The proliferation of PLC/PRF5 cell line was observed by methylthiazolyl tetrazolium assay ( MTT ) , plate clone formation assay ( PCFA ) and cell cycle assay.Results: shRNA-Hsf1 could significantly inhibit the expression of Hsf 1 in PLC/PRF5 cells.It could induce PLC/PRF5 cells stopping at G1 phase of cell cycle , inhibit cell proliferation and colonal formation;silencing Hsf1 caused up-regulation of p53 and Rb proteins expression in PLC/PRF5 cells.Conclusion: Silencing Hsf1 is involved in up-regulation of p53 and Rb proteins expression , which results in inhibiting proliferation of PLC/PRF5 hepatoma cells.
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