甘蔗转基因甘露糖筛选系统的建立  

Establishment of Mannose Selection System in Sugarcane Transformation

作　　者：王文治[1] 杨本鹏[1] 蔡文伟[1] 冯翠莲[1] 王俊刚[1] 熊国如[1] 张树珍[1] 

机构地区：[1]中国热带农业科学院甘蔗研究中心中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口571101

出　　处：《生物技术通报》2015年第1期92-97,共6页Biotechnology Bulletin

基　　金：现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-20-2-5);Cry1Ac-2A-gna融合基因遗传转化甘蔗的研究项目(31101197;2012-2014)

摘　　要：以甘露糖作为筛选底物,对甘蔗品种新台糖22号进行临界筛选浓度测定,获得愈伤组织的继代、分化、生根的临界筛选浓度。而后应用含有甘露糖筛选标记基因pmi及绿色荧光蛋白报告基因GFP的植物表达载体,通过农杆菌介导法对新台糖22号的愈伤组织进行遗传转化。用所测定的临界筛选浓度先后进行继代、分化、生根筛选培养,获得抗性植株。对获得的抗性植株分别进行pmi基因和GFP基因的PCR检测,以及GFP显微镜荧光检测,结果证实已成功建立了高效的甘蔗转基因甘露糖筛选系统。In this research the killing curve of mannose was tested at the subculture,differentiation and rooting stages of sugarcane cultivar ROC22. Then the expression cassette containing a pmiselection marker gene and a GFP report gene was transformed into sugarcane embryonic callus byAgrobacterium-mediated method. Resistant plants were obtained after selection by Mannose. The PCR detection result and GFP microscope observation result both show that our lab had established a high efficiency PMI/Mannose selection system in sugarcane transformation.

关 键 词：甘蔗转基因 甘露糖 pmi基因 GFP基因 

分 类 号：S566.1[农业科学—作物学]