猪圆环病毒2型ORF2基因在Sf9细胞中表达及免疫原性研究  

作　　者：朱鹏[1,2] 张小飞 徐延伟 尹秀凤 

机构地区：[1]安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036 [2]南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所,江苏南京211102

出　　处：《畜牧与兽医》2015年第2期85-88,共4页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

摘　　要：利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳(Cap)蛋白。将优化合成的PCV2 ORF2基因克隆到杆状病毒转移载体p Fast HTA中,并将鉴定正确的重组质粒p Fast HTA-Cap2转化至大肠杆菌感受态细胞,经蓝白斑筛选得到含有目的基因的重组杆状病毒质粒(r Bac-Cap2),转染至Sf9细胞,获得重组杆状病毒,对感染重组杆状病毒的细胞培养物进行重组蛋白的表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析,并对表达的重组蛋白进行小鼠免疫试验及其病毒血清中和试验。SDS-PAGE分析表明,优化合成的PCV2 ORF2基因得到表达,蛋白分子质量大小为33 ku;Western blot证实重组蛋白能够识别抗PCV2阳性血清,表明重组蛋白具有反应原性;小鼠免疫试验结果显示,该蛋白能刺激机体产生特异性抗体,具有较好的免疫原性;病毒血清中和试验证实,抗PCV2 Cap血清抗体具有中和病毒的活性,中和效价为1∶42。该蛋白在杆状病毒系统中的成功表达,为PCV2感染的诊断及亚单位疫苗的研制奠定基础。

关 键 词：猪圆环病毒2型 重组CAP蛋白 免疫原性 中和活性 

分 类 号：S852.6[农业科学—基础兽医学]