STAT3基因siRNA表达载体的构建及鉴定  

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作  者:刘洋[1] 陈立军[2] 呼文亮[1] 

机构地区:[1]内蒙古医学院附属医院临床检验中心 [2]武警医学院生物化学教研室

出  处:《科学咨询》2015年第3期4-6,共3页

摘  要:目的:本研究利用RNA干扰技术,以Stat3为靶基因,设计构建重组体,并进行序列分析鉴定。方法:设计有小发夹结构的一条DNA序列,PCR扩增合成SECs表达框架,克隆至载体psiLentGeneTM中构建重组体,转化E.coli DH5α菌株,提取质粒进行酶切鉴定后测序分析。结果:酶切电泳测序分析表明,插入序列正确,重组质粒构建成功。结论:STAT3靶向RNA干扰重组体的成功构建和序列分析。Objective: To clone the recombinant plasmid affecting gene STAT3 translation by RNA interfering and analyze the nucleic acid sequence of the recombinant. Methods: The design has a small hairpin structure of DNA sequence, PCR amplification SECS synthetic siRNA expression,cloning vector to construct recombinants in psiLentGeneTM into E.coli DH5α strain, extract plasmid after enzyme digestion sequencing. Results:Sequencing analysis showed that the enzyme electrophoresis, insertion sequence is correct, the recombinant plasmid was successfully constructed. Conclusion: STAT3 targeting recombinant RNA interference was successfully constructed and sequence was analysised.

关 键 词:STAT3 RNA干扰 质粒 

分 类 号:Q756[生物学—分子生物学]

 

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