衍生化LC-MS测定人血浆中消旋卡多曲活性代谢物浓度及生物等效性  

Determination of Racecadotril's Active Metabolite by a New Derivative LC-MS Method and Their Bioequivalence in Healthy Chinese Volunteers

作　　者：俞佳[1] 马珂[2] 袁京群[3] 祁金文[1] 郑水莲[1] 毛小红[1] 

机构地区：[1]浙江省人民医院药学部,杭州310014 [2]浙江大学医学院附属邵逸夫医院药剂科,杭州310016 [3]浙江大学分析测试中心,杭州310029

出　　处：《中国现代应用药学》2015年第3期323-330,共8页Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy

摘　　要：目的 建立一种衍生化LC-MS检测人血浆中消旋卡多曲活性代谢物thiorphan（TP）浓度,同时评价消旋卡多曲2种规格散剂（10 mg.袋1和30 mg.袋1）和国产颗粒剂在健康人体内的药动学及生物等效性。方法 采用3制剂3周期二重3×3拉丁方设计,18名健康男性志愿者交叉单剂量口服受试制剂2种规格消旋卡多曲散（10 mg.袋1和30 mg.袋1）和参比制剂消旋卡多曲颗粒剂各300 mg后,采用衍生化LC-MS测定不同时间血浆中活性代谢物TP浓度,用DAS药动学程序进行药动学参数的计算及生物等效性评价。血浆样品中加入p-BPB衍生化试剂,得到稳定的TP衍生化产物,经乙酸乙酯萃取后,选替米沙坦作内标。色谱柱为Zorbax SB-C18（150 mm×2.1 mm,5μm）;流动相为5 mmol.L 1甲酸铵（甲酸调节pH至3.0）-乙腈（45︰55）;流速为0.2 mL.min 1;采用ESI＋SRM方式监测;TP衍生化产物m/z 452.10[M＋H]＋,内标替米沙坦m/z 515.30[M＋H]＋。结果 TP线性范围为6.28~1 256 ng.mL 1,最低检测浓度为6.28 ng.mL 1,提取回收率在77.5%~80.4%,日内、日间精密度RSD〈15%。受试制剂消旋卡多曲散（10 mg.袋1）,消旋卡多曲散（30 mg.袋1）和参比制剂消旋卡多曲颗粒的主要药动学参数：Tmax分别为（1.8±1.2）,（1.9±1.3）和（0.7±0.2）h,t1/2分别为（1.4±0.4）,（1.2±0.7）和（1.1±0.8）h,Cmax分别为（802.0±356.5）,（804.2±459.8）和（845.6±285.8）ng.mL 1,AUC0 8分别为（1 617.0±532.6）,（1 628.9±672.1）和（1 621.0±532.2）ng.h.mL 1,AUC0∞分别为（1690.8±567.2）,（1673.8±681.7）和（1 649.4±561.4）ng.h.mL 1。2种受试制剂的相对生物利用度分别为99.8%和100.5%。结论 本方法灵敏,有效,可准确检测人体血浆中TP的浓度。2种受试制剂和参比制剂具有生物等效性。OBJECTIVE To establish a LC/MS test method for determining the concentration of thiorphan（TP,the active metabolite of racecadotril） in thehuman plasma,the pharmacokinetics and bioequivalence of two racecadotril pulvis（10mg,30mg） and racecadotril granule（10mg） inhealthyhuman body.METHODS A single oral dose 300mg of three preparations was randomly given to 18healthy volunteers in a three cycle duplex 3×3 latin square crossover design.The concentration of TP in plasma,which was an active metabolite of racecadotril,was determined by LC-MS at different time.The pharmacokinetics parameters were calculated and the bioequivalence of three formulations were evaluated by DAS program.The p-BPB was added to the plasma as a derivative agent to achieve a stable TP-derivative.The TP-derivative was then extracted from the plasma using ethyl acetate.The method used telmisartan as internal standard material.In the test method,Zorbax SB-C18（150mm×2.1mm,5μm） was used as chromatogram column,5mmol·L-1 ammonium formate（adjust pH to 3.0 with formic acid）-acetonitrile（45∶ 55） as mobile phase,the flow rate 0.2 m L·min-1,ESI＋SRM as detector.RESULTS The analytical method validation of TP was as follows： linear range 6.28-1 256 ng·m L-1,detection limit 6.28 ng·m L-1,extraction rate 77.5%-80.4%,precision of within and between day（RSD） both 15%.The main pharmacokinetic parameters of racecadotril pulvis（10mg）,racecadotril pulvis（30mg） and reference granules were as follows： Tmax（1.8±1.2）,（1.9±1.3） and（0.7±0.2）h,t1/2（1.4±0.4）,（1.2±0.7） and（1.1±0.8）h,Cmax（802.0±356.5）,（804.2±459.8） and（845.6±285.8）ng·m L-1,AUC0-8（1 617.0±532.6）,（1 628.9±672.1） and（1 621.0± 532.2）ng·h·m L-1,AUC0-∞（1 690.8±567.2）,（1 673.8±681.7） and（1 649.4±561.4）ng·h·m L-1,respectively.The relative bioavailability of 2 test pulvis versus reference granule were 99.8% and 100.5%,respectively.CONCLUSION The test method of determining the concentration o

关 键 词：消旋卡多曲 LC/MS 血药浓度 药动学 生物等效性 衍生化 

分 类 号：R917.101[医药卫生—药物分析学] R969.1[医药卫生—药学]