补肾活血方中5种黄酮类成分的体外抗炎活性  

In Vitro Anti-inflammatory Activity of Five Flavonoids from Bushen Huoxue Recipe Based

作　　者：孙东东[1] 程海波[1] 沈卫星[1] 王卓[1] 晏婷婷[1] 

机构地区：[1]南京中医药大学转化医学研究中心,国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室,江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室,南京210023

出　　处：《中国实验方剂学杂志》2015年第7期137-141,共5页Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae

基　　金：江苏省中医药局科技项目(LZ13013);江苏高校优势学科建设工程资助项目(2011ZYX6-013);江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ12-0626)

摘　　要：目的:观察补肾活血方中槲皮素、儿茶素、淫羊藿次苷II、金丝桃苷、淫羊藿苷等5种黄酮类成分对肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及一氧化氮(NO)等炎症介质释放浓度的影响作用,探讨复方治疗骨关节炎的初步机制。方法:采取LC-MS技术进行定性分析,选取补肾活血方水提液中存在的具有潜在治疗骨关节炎活性的槲皮素等5种黄酮类化合物(槲皮素、儿茶素、淫羊藿次苷Ⅱ、金丝桃苷、淫羊霍苷),采用体外脂多糖(LPS)刺激的RAW 264.74小鼠巨噬细胞为模型,随机分为空白组,模型组,槲皮素低、高剂量组(20,100 mg·L-1),儿茶素低、高剂量组(20,100 mg·L-1),淫羊藿次苷Ⅱ低、高剂量组(20,100 mg·L-1),金丝桃苷低、高剂量组(20,100 mg·L-1),淫羊藿苷低、高剂量组(20,100 mg·L-1),利用酶联免疫法(ELISA)测定细胞释放TNF-α,IL-6及NO的抑制作用。结果:结合LC-MS分析,确定补肾活血方水提液中确实存在槲皮素、儿茶素、淫羊藿次苷Ⅱ、金丝桃苷以及淫羊藿苷等黄酮类化合物。与空白组比较,模型组TNF-α,IL-6,NO含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,槲皮素与淫羊藿苷在100 mg·L-1,以及淫羊藿次苷II在20,100 mg·L-1对TNF-α的释放具有显著的抑制作用(P<0.01),儿茶素与淫羊藿次苷II在100 mg·L-1,槲皮素与淫羊藿苷在20,100 mg·L-1均对IL-6水平具有显著的抑制(P<0.01),金丝桃苷在100 mg·L-1,槲皮素、儿茶素、淫羊藿次苷II以及淫羊藿苷在20,100 mg·L-1均对NO的释放具有显著抑制(P<0.01)。结论:补肾活血方的治疗骨关节炎活性可能是通过抑制炎症介质释放,降低TNF-α,IL-6,NO等含量发挥作用,这对验证复方药效活性,探究效应物质基础具有重要意义。Objective ： To observe the effect of quereetin, cianidanol, icarisid Ⅱ, hyperoside and icariin on the inflammatory mediators of tumor necrosis factor alpha （TNF-α）, interleukin-6 （IL-6） and nitric oxide （NO） , and to discuss the preliminary mechanism of Bushen Huoxue recipe in treating bone arthritis. Method： Qualitative analysis of five flavonoids in water extract of Bushen Huoxue recipe was performed using LC-MS technology, because they may have a potential effect on osteoarthritis. RAW264.74 murine maerophages was stimulated by lipopolysaeeharide （LPS） in vitro and divided into the blank group, the model group, the low-and high-dose of five flavonoids groups （20, 100 mg·L^-1）. The effects on IL-6, TNF-α and NO of five flavonoids were detected by ELISA. Result： Quereetin （ 100 mg·L^-1） , ieariin （ 100 mg·L^-1 ） and iearisid Ⅱ （20, 100 mg·L^-1） had a significant inhibition on the release of TNF-α. Cianidanol （ 100 mg·L^-1 ） , icarisid Ⅱ （100 mg·L^-1）, quercetin （20, 100 mg·L^-1） and ieariin （20, 100 mg·L^-1） had a significant inhibition on IL-6. Hyperoside （100 mg·L^-1） and four the other flavonoids （20, 100 mg·L^-1） had a remarkable inhibition on the release of NO. Conclusion： The mechanism of Bushen Huoxue recipe in treating osteoarthritis may be contributed by inhibiting the release of inflammatory mediators of TNF-α, IL-6 and NO. The results are helpful for exploring the material basis of Bushen Huoxue recipe.

关 键 词：补肾活血方 骨关节炎 黄酮 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-6 一氧化氮 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]