1，25-二羟维生素D3对糖尿病肾病大鼠维生素D受体及肾脏纤维化的影响  

Positive impact of 1,25-dihydroxy vitamin D3 on vitamin D receptor and renal fibrosis in diabetic nephropathy rats

作　　者：张园园[1] 俞瑞[1] 田燕燕[1] 杨烨[1] 吕国栋[2] 朱佳[1] 肖拉提[1] 朱筠[1] 

机构地区：[1]新疆医科大学第一附属医院内分泌科,乌鲁木齐830054 [2]新疆医科大学临床研究院

出　　处：《中华糖尿病杂志》2015年第2期105-109,共5页CHINESE JOURNAL OF DIABETES MELLITUS

基　　金：国家自然科学基金（81160116）

摘　　要：目的探讨1，25-二羟维生素D3（活性VitD3）对VitD受体（VDR）及糖尿病肾病（DN）纤维化的作用及机制。方法清洁级健康雄性SD大鼠，成功建立DN大鼠模型24只，分4组。给予大鼠肾脏注射不同类型转化生长因子β1（TGF-β1）慢病毒，使TGF-β1表达不同水平：（1）高表达花生油组（A组）；（2）空病毒花生油组（B组）；（3）高表达VitD组（D组）；（4）空病毒VitD组（E组）；正常大鼠作为正常对照组（C组）。分别予VitD或花生油（对照）灌胃37d后取肾脏。电镜观察肾脏形态变化，MASSON染色观察肾脏纤维化程度，免疫组化、rt-PCR、Western blotting检测TGF-β1、VitD受体（VDR）、单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、胶原蛋白．1（Col-1）mRNA和蛋白表达量。多组间比较采用方差分析。两组间比较采用t检验结果（1）A、B组TGF-β1表达高于其余3组。（2）A、B组MCP-1、Col-1mRNA和蛋白表达均高于E组（均P〈0．05）。VDRmRNA和蛋白表达水平在A组（0．65±0．44、2．01±0．70），B组（1．17±0．59、3．19±1．01）均低于C组（3．93±1．17、5．38±0．48；F=19．28、19．11，均P〈0．01）。（3）活性VitD干预后，D组及E组的TGF-β1、MCP-1、Col-1mRNA和蛋白表达分别低于A组及B组（均P〈0．05），VDRmRNA及蛋白表达水平增加（t=5．61、2．95；t=5．42、3．33，均P〈0．05）。（4）在电镜中，VitD干预后肾脏纤维化程度减轻；在免疫组化中VitD干预后TGF-β1、MCP-1、Col-1表达减少，VDR表达增加。结论活性VitD，可能通过上调VDR，下调纤维化因子TGF—β1、MCP-1、Col-1的表达，起到防止纤维化发生的作用；在不同TGF-β1表达状态下，活性VitD，仍能通过调节上述因子发挥肾脏保护作用。Objective To determine the role and possible mechanisms of 1,25-dihydroxy vitamin D3 and vitamin D receptor（VDR）in anti-fibrosis of diabetic nephropathy（DN）. Methods DN rats（n=24） were randomly divided into 4 groups as blow： （1）over-expression with arachis oil group （group A, n=6）;（2） over-expression with vitamin D group （group D, n=6）;（ 3 ）virus vector with arachis oil group （group B,n=6）; （4） virus vector with vitamin D group （group E, n=6）. Six normal rats was resigned as control group with araehis oil （group C, n=6）. DN rats were injected different lentivirus with transforming growth factor beta 1 （TGF-β1） to establish the model. After a 37 days gavage of 1,25-dihydroxy vitamin D3 or arachis oil, the kidney was taken out as samples. The structure and morphology change in kidney tissues was observed by electron microscope and Masson staining;the expressions of mRNA and protein of TGF-[3~, VDR, moynocte chemoattractant protein-1 （MCP-1）, collagen-1 （Col-l） in kidney tissues were measured by immunohistochemistry, Western blotting and real-time PCR. Variance analysis was used to compare among muhigroups, and t test was used to compare two groups. Result （ 1 ） Glomerular fibrosis was correlated with TGF-β1 level. （2）MCP-1, Col-1 mRNA and protein expressions were all decreased （all P〈0.05 ）, while VDR was increased in group A （ 0.65±0.44,2.01 ±0.70）, B （ 1.17 ±0.59,3.19 ± 1.01 ） and C （ 3.93± 1.17,5.38± 0.48 ） with the reducing level of TGF-β1 （F=19.28,19.11, all P〈0.01 ）. （3） After the intervention of 1,25-dihydroxy vitamin D3 in group D, TGF-β1, MCP-1 and Col-1 mRNA and protein expressions are decreased （ all P〈 0.05 ） ;while VDR mRNA and protein expressions was increased （t=5.61,2.95;a11P〈0.05）, compared with group A. In group E, TGF-β1, MCP-1 and Col-1 expressions were decreased （all P〈0.05） ; while VDR was increased （t=5.42, 3.33; all P〈0.05） , compared with group B. （4）The s

关 键 词：骨化三醇 糖尿病肾病 转化生长因子Β1 维生素D受体 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]