小鼠淋巴细胞增殖法评价热毒宁注射液中间体和制剂的致敏性  

Allergenicity Evaluation of Reduning Injection and Intermediate Using the Mouse Spleen Cell Proliferation Assay

作　　者：周婧 马宏跃 范麒如[2,4] 吴启南 萧伟[2,4] 王团结[2,4] 张军峰[3] 詹瑧[3] 佟书娟[3] 

机构地区：[1]南京中医约大学药学院,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,南京210023 [2]江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001 [3]南京中医药大学基础医学院,南京201123 [4]中药制药过程新技术国家重点实验室,南京210023

出　　处：《中国药学杂志》2015年第7期586-589,共4页Chinese Pharmaceutical Journal

基　　金：江苏省中药资源产业化过程协同创新中心基金资助项目(ZDXM-1-14);中药制药过程新技术国家重点实验室开放课题资助项目(SKL2010Z0404);江苏省中医药局康缘中医药科技创新基金资助项目(HZ1007KY);江苏高校优势学科建设工程资助项目

摘　　要：目的采用小鼠淋巴细胞增殖法,评价热毒宁注射液中间体和成品制剂的致敏性。方法热毒宁制剂经3KD超滤富集制备大分子部位,加入小鼠脾脏单个核细胞培养3 d,台盼蓝染色活细胞数目,以评价中药注射液的致敏性强度。结果热毒宁中间体1号有最强的淋巴细胞刺激作用,随着中间体工艺精制,中间体2～5号的刺激活性依次减弱。使用该模型对热毒宁成品注射液的检测,发现已知具有临床不良反应的批次均有显著淋巴细胞刺激性,而已知无临床不良反应批次无刺激性。并发现两个批次未知样本存在淋巴细胞刺激性。结论热毒宁的四步精制工艺排除了原料中的淋巴细胞刺激性的物质。热毒宁成品制剂基本没有该刺激作用,但已知临床过敏反应的批次仍具有淋巴细胞刺激作用。3KD超滤富集-单个核细胞体外增殖模型,可用于热毒宁注射液中大分子物质的检测。OBJECTIVE To evaluate the allergenicity of Reduning injection and intermediate using ultrafiltration and the mouse spleen cell proliferation assay.METHODS The samples obtained by 3 kd ultra-filtration,were incubated with mouse spleen mononuclear cells for 3 d,and then the trypan blue staining was used to count the alive cells for the evaluation of drug allergenicity.RESULTS Effect of No.1 of Reduning intermediate was strongest to stimulate proliferation of mononuclear cells,and then actions of No.2-5 decreased in turn,after the refining processing.CONCLUSION A four-step refining process reduces the stimulated actions of Reduning intermediates on the mononuclear cell proliferation.Most Reduning injection have no this action,but several batches of samples with known clinical allergic reaction have the stimulated actions on the mononuclear cell proliferation.Ultrafiltration-mononuclear cell proliferation assay could be used for the determination of macromolecular substances from Reduning injection.

关 键 词：药物过敏反应 单个核细胞 热毒宁注射液 超滤富集 

分 类 号：R965[医药卫生—药理学]