IR-3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞的建立  

Establishment of a cell model of insulin-resistant 3T3-L1 adipocytes

作　　者：聂绪强[1,2] 杨建文[1] 史海霞[3] 张玉金[1] 张建永[1] 卞卡[2,4] 

机构地区：[1]遵义医学院药学院,贵州遵义563000 [2]上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心,上海201203 [3]上海交通大学医学院附属第三人民医院中医科,上海201999 [4]美国乔治华盛顿大学生物化学与分子医学系,美国华盛顿20052

出　　处：《南方医科大学学报》2015年第1期103-108,共6页Journal of Southern Medical University

基　　金：遵义医学院博士启动基金(F-626);上海市教委高校一氧化氮与炎症医学E研究院计划项目(E-04010)

摘　　要：目的探讨3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞（insulin resistant 3T3-L1 adipocytes cell,IR-3T3-L1）最佳的建立条件。方法采用地塞米松（Dexamethason,DEX）、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤（3-isobutyl-methylxanthine,IBMX）和不同浓度的胰岛素（10^-8、10^-7、10^-6mol·L-1）诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,Oil red O染色确定最佳胰岛素诱导浓度,继而用1μmol·L-1DEX诱导建立IR-3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶（Glucose oxidase-peroxidase,GOD-POD）法对IR-3T3-L1细胞的最佳诱导时间（24~120 h）及其稳定时间（24~48 h）进行了考察。结果 Oil red O染色发现3T3-L1前脂肪细胞用DEX、IBMX和10-6mol·L-1胰岛素诱导9 d,〉90%的前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞;用1μmol·L-1DEX培养96 h后,脂肪细胞葡萄糖消耗率达到最大（P=0.0003）;稳定时间考察发现,在36 h内葡萄糖消耗与对照组比较有统计学意义（P〈0.001）。结论3T3-L1前脂肪细胞在1μmol·L-1DEX、0.5 mmol·L-1IBMX和10-6mol·L-1最佳胰岛素浓度作用下诱导分化为成熟的脂肪细胞后,用1μmol·L-1DEX培养96 h即可成功诱导成IR-3T3-L1-IR脂肪胰岛素抵抗细胞,且在36 h内稳定。Objective To investigate the optimal conditions for establishing insulin- resistant 3T3- L1 adipocytes. Methods Dexamethason（DEX）, 3- isobutyl- methylxanthine（IBMX） and different concentrations of insulin（10^- 8, 10^- 7, and 10^- 6mol · L- 1）were used to induce 3T3- L1 preadipocytes into mature adipocytes identified by oil red O staining. We established insulinresistant 3T3-L1 adipocytes cell model（IR-3T3-L1） by exposing the cells to 1 μmol· L-1DEX, and the changes of glucose concentration in the cell culture were determined by glucose oxidase-peroxidase（GOD-POD） assay. Results Treatment of 3T3-L1 cells with DEX, IBMX and 10- 6mol· L- 1insulin for 9 days resulted in the differentiation of 90% of the cells into mature adipocytes.IR- 3T3- L1 cells cultured for 96 h in the culture media containing 1 μmol · L- 1DEX showed significantly increased glucose consumption（P=0.0003） as compared with the control group at 36 h（P〈0.001）. Conclusion 3T3- L1 cells can be induced into mature adipocytes by exposure to 1 μmol· L-1DEX, 0.5 mmol· L-1IBMX and 10-6mol· L-1insulin. A 96 h exposure to 1 μmol· L-1DEX can induce 3T3-L1 adipocytes to acquire insulin resistance that can be maintained for 36 h.

关 键 词：3T3-L1脂肪细胞 胰岛素抵抗 地塞米松 葡萄糖消耗 胰岛素 

分 类 号：R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]