白细胞介素35＋调节性B淋巴细胞在川崎病免疫发病机制中的作用  

The role of interleukin - 35 - producing regulatory B cells in immune pathogenesis of Kawasaki disease

作　　者：赵俊山[1] 王勤[2] 温鹏强[1] 徐明国[1] 齐中香[1] 李成荣[1] 王国兵[1] 

机构地区：[1]遵义医学院深圳市儿童医院儿科研究所,深圳518038 [2]南方医科大学附属深圳市妇幼保健院中心实验室

出　　处：《中华实用儿科临床杂志》2015年第9期662-666,共5页Chinese Journal of Applied Clinical Pediatrics

基　　金：国家自然科学基金（81102227,81300124）;广东省医学科学技术研究基金（A2012582,A2013604）

摘　　要：目的探讨白细胞介素（IL）-35＋调节性B淋巴细胞（IL-35＋Breg）在川崎病（KD）免疫发病机制中的作用。方法急性期KD患儿32例，同年龄体检健康儿童28例为健康对照组。KD患儿分别于治疗前、治疗后取血备检。采用流式细胞术检测外周血IL-35＋Breg、调节性T淋巴细胞（Treg）比例及程序性死亡因子配体1（PD—LI）、CD16q、程序性死亡因子1（PD-1）、CD43、IL-12p35、EB病毒诱导基因3（IL-27EBl3）、IL-12受体B2（IL-12Rβ2）、IL-27受体α（IL-27Rα）、磷酸化信号转导和转录活化因子1（pSTATI）、磷酸化信号转导和转录活化因子3（pSTAT3）蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD19-细胞Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2（SHP-2）、磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）、vav1鸟嘌呤核苷酸交换因子（Vav）mRNA表达；酶联免疫吸附法检测血浆中IL-35、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、IL-12水平。结果1．急性期KD患儿外周血IL-35＋Breg细胞比例较健康对照组显著降低[（5．79±2．60）％比（12．65±5．34）％；F=19．23，P〈0．05]，其胞内IL-12p35、IL-27EBI3、IL-10表达水平明显低于健康对照组（F=9．70、14．30、7．08，P均〈0．05），经静脉注射丙种球蛋白（IVIG）治疗后显著上调[IL-35＋Breg：（10．52±4．95）％；P〈0．05]。2．急性期KD患儿Treg比例及其胞内IL-12p35、IL-27EBl3表达水平明显低于健康对照组[Treg：（4．12±1．51）％比（8．06±3．32）％；F=19．70、17．69、38．22，P均〈0．05]，其中Treg与IL-35＋Breg细胞比例呈正相关（r：0．69，P〈0．05），血浆IL-35水平及CD19＋B淋巴细胞IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达水平均显著降低（F=8．09、7．54、7．69、5．89、12．59，P均〈0．05），经IVIG治疗后明显增高[Treg：（7．39±2．85）％；P均〈0．05]。3．急性期KD患儿CD14＋细胞过表达PD—L1、CD169（F=24．94、16．53，P均〈0Objective To investigate the role of IL - 35 - producing regulatory B cells （ IL - 35 ＋ Breg） in im- munological pathogenesis of Kawasaki disease （KD）. Methods Thirty - two children with KD and 28 age - matched healthy children were allowed to participate in this study. Flow cytometry was performed to evaluate the proportions of IL - 35 ＋ Breg as well as requlatory T cells （Treg） and expression levels of associated molecules such as programmed death - ligand 1 （ PD - L1 ）, CD169, programmed death 1 （ PD - 1 ）, CD43, IL - 12p35, epstein - Barr virus induced 3 （ IL - 27EBI3 ）. IL - 12 receptor beta 2 （ IL - 12R132）, IL - 27 receptor alpha（ IL - 27Rot）, phosphated signal transdu- cer and activator of transcription 1 （ pSTAT1 ） and phosphated signal transducer and activator of transcription 3 （ pSTAT3 ）. Transcription levels of the Src homology 2 domain - containing protein tyrosine phosphatase 2 （ SHP - 2 ）, phosphatase and tensin homolog （PTEN） ,vavl guanine nucleotide exchange factor（Vav） in CD19＋ B cells were deter- mined by using quantitative real - time PCR. Plasma concentrations of IL - 35, tumor necrosis factor α （ TNF - α） and IL - 12 were measured by adopting enzyme - linked immunosorbent assay. Results （ 1 ） The proportions of IL - 35 ＋ Breg and its expressions of IL - 12p35, IL - 27EBI3 and IL - 10 in patients with acute KD were lower than those of healthy controls [ IL - 35 ＋ Breg： （5.79 ± 2.60） % vs （ 12.65 ± 5.34 ） % ; F = 19.23,9.70,14.30.7.08 ; all P 〈 0. 05 ）, but they were significantly increased after intravenous immune globulin （ IVIG ） treatment [ IL - 35 ＋ Breg ： （10.52 ± 4.95 ）% ;all P 〈 0.05 ]. （2）The proportions of Treg and its transcriptional levels of IL - 12p35 and IL - 27EBI3 were down - regulated during acute KD [ Treg： （4. 12 ± 1.51 ） % vs （ 8.06 ± 3.32 ） % ; F = 19.70,17.69, 38.22 ; all P 〈 0.05 ] , but were increased after therapy [ Treg ： （ 7.39 ± 2.85 ） %

关 键 词：白细胞介素35 调节性B淋巴细胞 川崎病 调节性T淋巴细胞 免疫调节 

分 类 号：R725.4[医药卫生—儿科]