上调小鼠骨髓来源树突状细胞FcγRⅡb表达可抑制其抗原提呈功能  

作　　者：孙卉[1] 马海峰 曹秀琴[3] 杨志伟[1] 

机构地区：[1]宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,宁夏银川750004 [2]解放军401医院医务处,山东青岛266071 [3]宁夏医科大学基础医学院生育力保持省部级共建教育部重点实验室,宁夏银川750004

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2015年第5期664-667,671,共5页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金(81160375);宁夏医科大学校级科研项目(XZ201403)

摘　　要：目的构建FcγRⅡb慢病毒载体,感染小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC),观察BMDC抗原提呈功能变化。方法小鼠骨髓细胞中提取RNA,反转录后进行PCR扩增得到FcγRⅡb目的基因,将FcγRⅡb基因插入慢病毒表达载体TRE中构建FcγRⅡb重组慢病毒载体。HEK293T细胞包装慢病毒,体外进行小鼠BMDC的诱导培养及鉴定。将慢病毒感染BMDC后,实时定量PCR检测BMDC中FcγRⅡb mRNA水平,Western blot法检测BMDC中FcγRⅡb蛋白水平,流式细胞术分析BMDC表面分子CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的变化。结果成功构建FcγRⅡb重组慢病毒载体,经酶切、PCR鉴定及测序鉴定成功。体外诱导培养BMDC,可见细胞表面大量树枝样突起形成。包装慢病毒感染BMDC后,FcγRⅡb mRNA和蛋白水平均较未感染BMDC增高。流式细胞术分析感染后BMDC表面分子CD80、CD86、CD40、MHC II的表达量均较未感染BMDC下降。结论DC上FcγRⅡb的过表达能够下调其抗原提呈功能。

关 键 词：FcγRⅡb 慢病毒 树突状细胞 

分 类 号：R392.1[医药卫生—免疫学] R456[医药卫生—基础医学]