免疫毒素Trastuzumab-Cucurmosin(T-CUS)的制备及鉴定  

Preparation and Identification of the Immunotoxin Trastuzumab-Cucurmosin

作　　者：林接玉 付明娟 许春森[3] 谢捷明[1] 

机构地区：[1]福建医科大学药学院药理学系,福州350004 [2]福建医科大学附属协和医院药学部,福州350001 [3]福建医科大学附属协和医疗乳腺外科,福州350001

出　　处：《海峡药学》2015年第5期239-242,共4页Strait Pharmaceutical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No30772587);福建省自然科学基金资助项目(No C0510012;2011J01188);福建省卫生厅项目(No2011-cxb-8);福建医科大学项目(No JS14011;20BJY018)

摘　　要：目的制备由抗人类表皮生长因子受体2(HER-2/NEU)单克隆抗体曲妥珠单抗(Trastuzumab,简称T)与南瓜蛋白(Cucurmosin,简称CUS)偶联而成的免疫毒素,并进行鉴定。方法以N-琥珀酰胺-3-(2-吡啶二硫)丙酸酯(SPDP)为偶联剂,制备T-CUS,经过Ni Sepharose 6 Fast Flow和SP Sepharose 6 Fast Flow纯化后SDS-PAGE分析其纯度及成分,细胞ELISA法检测其对人乳腺癌BT-474细胞的结合能力。结果 SDSPAGE分析显示T-CUS免疫毒素成功构建,免疫毒素基本保留了对BT-474细胞的结合能力。结论利用SPDP可实现曲妥珠单抗与CUS的成功偶联。OBJECTIVE To prepare an immunotoxin （ IT） by coupling the monoclonal antibody against human epidermal growth factor receptor （ HER-2/NEU） to Cucurmosin（ CUS） ,then identify.METHODS T-CUS was pre-pared using N-succinimidyl-3-（2-pyridyldithio）-propionate （ SPDP） as a coupler,and was purified using Ni Sepha-rose 6 Fast Flow column and SP Sepharose 6 Fast Flow column, then analyzed for purity and component by SDS-PAGE,and determined for binding ability to human breast cancer BT-474 cells by ELISA.RESULTS SDS-PAGE showed that T-CUS was successfully constructed,and the binding ability of human breast cancer BT-474 cells was ba-sically retained.CONCLUSION Trastuzumab may be successfully coupled to CUS by using SPDP.

关 键 词：人类表皮生长因子受体2 曲妥珠单抗 南瓜蛋白 免疫毒素 

分 类 号：TQ460.4[化学工程—制药化工]