体外“鸡尾酒法”研究靶向小分子抗肿瘤化合物对人肝微粒体CYP450酶主要亚型的抑制作用  

Inhibitory effect of SPH0396,a small molecular targeted antitumor agent,on cytochrome P450 isozymes using an in vitro “cocktail”method

作　　者：张乐多[1] 向志雄[1] 万惠新[2] 夏广新[1] 

机构地区：[1]上海医药集团股份有限公司中央研究院药物评价二室,上海201203 [2]上海医药集团股份有限公司中央研究院药物化学研究室,上海201203

出　　处：《中国新药杂志》2015年第13期1523-1530,共8页Chinese Journal of New Drugs

摘　　要：目的：评价靶向小分子抗肿瘤化合物SPH0396在体外对人肝微粒体CYP450酶7种主要亚型的直接抑制作用和时间依赖性抑制作用,从而为预测其体内抑制情况和临床药物-药物相互作用提供依据。方法：采用人肝微粒体外＂鸡尾酒法＂的孵育体系,选取人肝微粒体CYP450酶7种主要亚型的混合探针底物,以液质联用（LC/MS/MS）法同时测定各探针底物相应代谢产物的生成量,并求算SPH0396对7种主要亚型直接抑制的半数抑制浓度（IC50）值和时间依赖性抑制的IC50偏移值,进而评价SPH0396对7种主要亚型的抑制作用。结果：SPH0396对CYP1A2的IC50〉100μmol·L-1,没有直接抑制;对CYP3A4/5,CYP2D6,CYP2C9,CYP2C19的IC50在10~17.6μmol·L-1之间,为较弱的直接抑制作用;对CYP2B6和CYP2C8的IC50值均为2.2μmol·L-1,为中等强度直接抑制作用;对CYP2D6,CYP2C9,CYP2C19,CYP1A2,CYP2B6和CYP2C8的IC50没有偏移,但是对CYP3A4/5的IC50偏移分别为2.6（咪达唑仑）和4.2（睾酮）,因此对CYP3A4/5存在时间依赖性抑制作用。结论：SPH0396对主要的CYP450酶亚型存在直接抑制和机制性抑制作用,如果SPH0396被开发为临床药物,必须密切关注其与上述酶底物之间发生药物相互作用而导致合用药物药动学改变的可能,避免临床药效无法发挥,甚至不良反应的加剧。Objective： To evaluate whether SPH0396 is a direct inhibitor or time-dependent inhibitor to cytochrome P450 isozymes,then further predict the potential of drug-drug interaction with the substrates in clinical study. Methods： The incubation system contained human liver microsomes,substrate cocktail,NADPH,positive control cocktail or SPH0396 at various concentrations. LC / MS / MS was used to detect the relative quantity of the substrate metabolites,and then the IC50 and IC50shift values were calculated to estimate the potential inhibition of SPH0396. Results： In the direct inhibition experiment,IC50 value of SPH0396 was more than 100 μmol·L-1to CYP1A2; 10 ~ 17. 6 μmol·L-1to CYP3A4 /5,CYP2D6,CYP2C9 and CYP2C19; and 2. 2 μmol·L-1to bothCYP2B6 and CYP2C8. In the time-dependent inhibition experiment,no IC50 shift occurred to CYP2D6,CYP2C9,CYP2C19,CYP1A2,CYP2B6 and CYP2C8,but IC50 shifts were 2. 6（ midazolam） and 4. 2（ testosterone） to CYP3A4 / 5. Conclusion： SPH0396 is a direct inhibitor to CYPs,especially to CYP2B6 and CYP2C8,and a timedependent inhibitor to CYP3A4 /5. If SPH0396 being developed as a clinical drug,we must pay close attention to drug-drug interactions caused by the changed exposure to combined drug,to avoid the lowering of clinical efficacy and the intensification of adverse reactions.

关 键 词：靶向小分子药物 CYP450 直接抑制 时间依赖性抑制 

分 类 号：R965.2[医药卫生—药理学]