单嗜性包装细胞包装逆转录病毒方法研究  

Transformation of Ecotropic Packaging Cell Line to Pantropic Packaging Cell Line

作　　者：张杰[1] 王彦刈[2] 吕磊[2] 郁建平[1] 

机构地区：[1]贵州大学生命科学学院,贵州贵阳550025 [2]杭州电子科技大学生命信息与仪器工程学院,浙江杭州310018

出　　处：《贵州大学学报（自然科学版）》2015年第3期28-31,共4页Journal of Guizhou University:Natural Sciences

基　　金：贵州省农业攻关项目(黔科合NY字[2011]3094号);贵州省教改项目:制药工程专业综合改革试点项目

摘　　要：逆转录病毒的感染范围(嗜性)是由所使用的包装细胞表达的包膜蛋白所决定的,因此改变现有的包装细胞的包膜蛋白就可以改变所包装的逆转录病毒的嗜性。为了达此目的,在稳定表达MMLV包膜蛋白的逆转录病毒包装细胞BOSC23细胞中共转染VSV-G表达载体和表达GFP的逆转录病毒载体,结果包装出的逆转录病毒只能感染少量的人源性的293F细胞,说明VSV-G不能完全替换掉MMLV包膜蛋白。因此我们利用RNA干扰技术首先沉默BOSC23细胞中的MMLV包膜蛋白的表达,然后共转染VSV-G表达载体和表达GFP的逆转录病毒载体,结果包装出了高滴度的泛嗜性的逆转录病毒。Because the tropism of the packaged retrovirus in laboratory is determined by the envprotein expressed in packaging cell line,we can get a new kind of packaging cell line by changing the tropism of another packaging cell line. However,we found that after transfecting BOSC23 cells expressing MMLV env protein with VSV-G vector encoding the VSV-G env glycoprotein,the produced virus could just infect a little human 293 F cells.Therefore,we silenced the expression of MMLV env gene using RNAi technology firstly,and transfected BOSC23 with VSV-G vector simultaneously. Finally,the high-titer pantropic retrovirus was obtained.

关 键 词：逆转录病毒 包装细胞 泛嗜性 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]