重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-Akt1构建及鉴定  

作　　者：孟利[1] 杜彩萍[1] 陆淳渊 侯筱宇[1] 

机构地区：[1]江苏省脑病生物信息重点实验室,徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,江苏徐州221002

出　　处：《生物技术世界》2015年第7期236-237,共2页Biotech World

基　　金：国家自然科学基金81173030

摘　　要：目的:构建大鼠Akt1-p Ad Track-CMV腺病毒穿梭质粒并鉴定其蛋白表达。方法:提取SD大鼠海马总RNA,利用RT-PCR方法扩增大鼠Akt1的c DNAs,将其亚克隆入T载体,双酶切鉴定后将其与经过同样处理的腺病毒穿梭质粒载体p Ad Track-CMV连接,经酶切和测序进行鉴定。将p Ad TrackCMV-Akt1转染293细胞,免疫印迹鉴定Akt1的表达。结果:成功克隆出Akt1目的基因,并将其亚克隆入腺病毒穿梭载体p Ad Track-CMV。免疫印迹结果显示,转染p Ad Track-CMV-Akt1的细胞中能检测出Akt1的特异性条带。结论:成功构建重组大鼠Akt1腺病毒穿梭质粒,且其在真核细胞中能高效表达。

关 键 词：AKT1 腺病毒穿梭质粒 pAdTrack-CMV 蛋白表达 

分 类 号：R3[医药卫生—基础医学]