耐酸性高温α-淀粉酶的诱变筛选及表达菌株的构建  

作　　者：温赛 孟青青[1] 王玉海[1] 王凤寰[1] 

机构地区：[1]北京工商大学食品学院,北京100048

出　　处：《饲料研究》2015年第15期64-69,共6页Feed Research

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(21406005)

摘　　要：利用化学诱变剂亚硝酸钠对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中高温α-淀粉酶基因amy进行体外诱变,通过定向筛选获得一个耐酸性高温α-淀粉酶突变体,其一级序列含有3个突变位点:第288位的亮氨酸突变为天冬氨酸,第289位的组氨酸突变为酪氨酸,第320位的丙氨酸突变为丝氨酸。克隆突变体基因amyM并构建地衣芽孢杆菌表达质粒pGJ103-amyM,将其转入已敲除内源α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌中获得表达耐酸性高温α-淀粉酶的基因工程菌B.licheniformis AMYM。B.licheniformis AMYM所产新型耐酸性高温α-淀粉酶的最适反应pH为5.2,较野生型降低1.2个单位,且最适反应温度95℃。5 L发酵罐内,B.licheniformis AMYM发酵酶活最高可达19 000 U/m L,具有良好的工业应用前景。

关 键 词：地衣芽孢杆菌 化学诱变 耐酸性Α-淀粉酶 

分 类 号：S816[农业科学—饲料科学]