alpha7烟碱型乙酰胆碱受体对脂肪细胞促酰化蛋白的表达及机制  

Effects of alpha7 nicotine acetylcholine receptor on acylation stimulating protein expression and as- sociated mechanism in 3T3 -L1 adipocytes

作　　者：吴静[1] 焦周阳[2] 杜心灵[3] 罗强 刘玉峰[1] 安金斗[1] 

机构地区：[1]郑州大学第一附属医院儿科,450052 [2]郑州大学第一附属医院心血管外科,450052 [3]华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科

出　　处：《中华实验外科杂志》2015年第8期1863-1865,共3页Chinese Journal of Experimental Surgery

基　　金：国家自然科学基金资助项目（81300685）

摘　　要：目的探讨alpha7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）对乳糜微粒（CM）介导的脂肪细胞促酰化蛋白（ASP）表达及其机制。方法诱导培养3T3-L1前脂肪细胞分化成熟；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定ASP和其前体补体c3（c3）表达；Westernblot法测定p38丝裂原活化蛋白激酶（p38）及磷酸化p38（p—p38）表达；实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测ASP受体C5L2表达。结果烟碱（1．0×10-9、1．0×10-8、1．0×10-7mot／L）呈浓度依赖性抑制CM（200μgTG／ml，24h）介导的C3和ASP表达上调（P〈0．05），α7nAChR特异性阻断剂α-银环蛇神经毒素（α-BTX）拈抗烟碱（10-8mot／L）介导这一效应[ASP（pmol／mgcellprotein）：0．81±0．35比0．71±0．22，P〈O．05：c3（pmol／mgcellprotein）：16．37±1．64比12．75±0．88，P〈0．05]；α7nAChR抑制CM介导的p—p38上调（1．65±0．11比2．18±0．23，P〈0．05），p38特异性抑制剂SB203580预处理组p-p38及C3较CM处理组明显降低[C3（pmol／mgcellprotein）：14．72±1．31比19．34±1．49，P〈0．05和p—p38：1．59±0．26比2．09±0．32，P〈0．05]；α7nAChR抑制CM介导的C5L2mRNA表达下调（0．56±O．08比0．44±0．14．P〈0．05）。结论a7nAChR通过下调C3及恢复C5L2表达进而抑制CM介导脂肪细胞的ASP表达上调，p38信号通路参与调控C3的表达。Objective To investigate the effects of alpha7 nicotine acetylcholine receptor （α7nAChR） on chylomicron （CM） -induced acylation stimulating protein （ASP） expression and its relat- ed mechanisms. Methods 3T3 - L1 preadipocytes were cultured and induced to differentiate. The expres- sion of complement C3 （ C3 ） and ASP was assessed by enzyme - linked immunosorbent assay （ELISA）. The total p38 mitogen - activated protein kinases （ p38 ） and phosphorylated p38 （ p - p38 ） were deter- mined by Western blotting. C5a like receptor 2 （C5L2） mRNA was detected by real -time quantitative polymerase chain reaction （ Real - time PCR）. Results α7nAChR agonist nieotine （ 1.0 × 10 -9, 1.0 × 10-8, 1.0 ×10-7 mo]/L） pretreatment inhibited CM （200 μg TG/ml, 24 h） - induced C3 and ASP re- lease in 3T3 - L1 adipocytes （P 〈0. 05）, an effect attenuated by α7nAChR selective nicotinic antagonist α-Bungarotoxin （α-BTX） [ASP （pmol/mg cell protein）： 0.81 ±0.35 vs. 0.71 ±0.22, P〈0.05; C3 （pmol/mg cell protein） ： 16. 37 ± 1.64 vs. 12. 75 ±0. 88, P 〈0. 05]. Furthermore, the inhibition of C3 expression by α7nAChR appears to be mediated by a reduction in phosphorylation of p38 （ 1.65 ± 0. 11 vs. 2. 18 ±0. 23, P 〈0. 05 ）. In addition, α7nAChR inhibits CM -induced C5L2 mRNA downregulation （0. 56 ± 0. 08 vs. 0. 44 ±0. 14, P 〈 0.05 ）. Conclusion ct7nAChR inhibits CM - induced ASP upregu- lation through downregulating C3 and restoring C5L2 mRNA. p38 signaling transduction pathway may be involved in the regulation of C3 expression.

关 键 词：alpha7烟碱型乙酰胆碱受体 促酰化蛋白 补体C3 P38丝裂原活化蛋白激酶 

分 类 号：R962[医药卫生—药理学]