均匀设计法优化人类SMN基因PCR扩增  

Optimizing the PCR Amplification of Human SMN Gene by Uniform Design Method

作　　者：高春艳[1,2] 李珺[1,2] 蔡禄[1,2,3] 

机构地区：[1]内蒙古科技大学生物工程与技术研究所,内蒙古包头014010 [2]内蒙古科技大学数理与生物工程学院,内蒙古包头014010 [3]内蒙古自治区生物质能源化利用重点试验室,内蒙古包头014010

出　　处：《湖北农业科学》2015年第12期3031-3033,共3页Hubei Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金项目(31360126);内蒙古自治区自然科学基金项目(2014MS0311)

摘　　要：采用均匀设计法,对影响PCR的主要因素,即退火温度、引物、Taq酶、二甲基亚砜(DMSO)、模板DNA进行了优化,得到人类SMN基因的最优PCR扩增体系。结果表明,PCR扩增条件和反应体系的最优组合为:退火温度61.6℃、Taq酶0.26μL、引物(10μmol/L)3.6μL、DMSO(100%)2μL、DNA 3.8μL。Based on uniform design method, the critical factors implicating with PCR, such as annealing temperature,primer,Taq polymerase,DMSO,DNA,were optimized respectively and PCR amplifying condition of human SMN gene was established. The results shouwed that annealing temperature 61.6 ℃,Taq polymerase 0.26 μL, primer（10 μmol / L）3.6 μL,DMSO（100%）2 μL,DNA3.8 μL were designated to the optimized combination between PCR amplifying condition and reaction system.

关 键 词：DNA 盐析法 均匀设计法 灰度分析 PCR扩增 

分 类 号：Q781[生物学—分子生物学]