猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒TaqMan二重荧光RT-PCR检测方法的建立  

作　　者：杜鹃 韦海涛 宋彦军 郑瑞峰 付彩霞 何伟勇[3] 郭峰 李佳 吴惠明 罗伏兵 

机构地区：[1]北京市动物疫病预防控制中心,北京大兴100101 [2]北京市畜牧总站,北京朝阳100107 [3]中国农业大学动物医学院,北京海淀100193

出　　处：《中国兽医杂志》2015年第7期44-47,I0004,共5页Chinese Journal of Veterinary Medicine

摘　　要：根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的S基因序列和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的N基因序列,设计特异性的引物和探针。通过对引物和探针浓度等反应液用量以及反应条件等因素进行优化试验,建立了能同时鉴别检测TGEV和PEDV的二重荧光RT-PCR方法。用该方法同时检测其他病原如Po RV、PCV和CSFV时不发生交叉反应,特异性好;较普通PCR均高出3个数量级的敏感性,能够检测10 TGEV和10 PEDV拷贝数,敏感性高;组内重复和组间重复试验结果变异系数小,稳定性好;同时检测2个模板的不同浓度组合试验,干扰性小。本试验建立的二重荧光RT-PCR方法可用于TGEV和PEDV的鉴别检测,且具有特异、敏感、稳定、快速等优点,为进一步应用于TGEV和PEDV的临床鉴别诊断和流行病学调查研究奠定了基础。

关 键 词：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 猪流行性腹泻病毒(PEDV) TAQ Man二重荧光RT-PCR 

分 类 号：S858.28[农业科学—临床兽医学]