高糖对大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响及其机制  

The effects and mechanisms of high glucose on the phenotype transformation of rat vascular smooth muscle cells

作　　者：张静[1] 楚海荣[2] 郭英[1] 刘建华[2] 李文凭[1] 李宏[2] 成敏[2] 

机构地区：[1]潍坊医学院临床学院 [2]潍坊医学院医学研究实验中心,山东潍坊261053

出　　处：《中国应用生理学杂志》2015年第5期458-461,共4页Chinese Journal of Applied Physiology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30900290;31270993);国家教育部"新世纪优秀人才计划"资助项目(NCET10-0922);山东省自然科学基金(ZR2013CQ032);山东省高等学校科技计划项目(J11LF17);山东省中医药科技发展计划项目(2013-239)

摘　　要：目的：探讨高糖对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）表型转化的影响及机制。方法：大鼠VSMCs由组织贴壁法培养获得,以3-5代细胞为靶细胞,待细胞融合后用含有2%胎牛血清的DMEM孵育12 h,再置于正常组（5.5 mmol/L glucose）、高糖（25 mmol/L glucose）、高糖＋P38抑制剂SB203580的DMEM继续培养24 h。用实时荧光定量RT-PCR分析各组VSMCs合成型标志蛋白OPN、收缩型标志蛋白α-SMA及基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的基因表达情况;Western blot检测各组OPN、α-SMA和磷酸化P38的蛋白表达情况。结果：1高糖促进了VSMCs的表型由收缩型转化为合成型,同时上调基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9的表达;2高糖能促进P38蛋白的磷酸化,增加磷酸化P38的蛋白表达量;3P38/MAPK信号通路抑制剂SB203580明显抑制了高糖促进VSMCs表型转化及MMP-2、MMP-9表达的效应。结论：高糖能通过P38/MAPK信号通路促进VSMCs的表型转化。Objective： To investigate the effects and mechanisms of high glucose on the phenotype transformation of rat vascular smooth muscle cells （VSMCs）. Methods： VSMCs were isolated from rat thoracic aorta and the 3rd - 5th VSMCs were incubated with normal glucose （5.5 mmol/L）, high glucose （25 mmol/L）, or high glucose （25 mmol/L） ＋ P38 inhibitor（25 mmol/L＋ SB203580） for another 24 hours. Then the gene expression of osteopontin （OPN）, alpha smooth-actin （a-SMA）, matrix metallopmteinase-2 （MMP-2） and matrix metallopro- teinase-9（MMP-9） were assayed by real time RT-PCR, the protein expression of P38 were assayed by Western blot. Results： （1）High glucose promoted the phenotype transformation of VSMCs and up-regulated the expression of MMP-2 and MMP-9. （2）High glucose promoted the phos- phorylation of P38. （3）SB203580, the inhibitor of P38/MAPK signal pathway, inhibited the effects of high glucose on phenotype transformation and expression of MMP-2 and MMP-9. Conclusion： High glucose may promote phenotype transformation of VSMCs via the signal pathway of P38/MAPK.

关 键 词：大鼠 平滑肌细胞 高糖 表型转化 P38/MAPK信号通路 

分 类 号：R331.3[医药卫生—人体生理学]