利用免疫共沉淀验证肌纤维形成相关蛋白CFL2与MEF2C的相互作用  

作　　者：许晶[1] 朱弘焱[1] 田玉民[1] 苏玉虹[1] 

机构地区：[1]辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州121000

出　　处：《畜牧与兽医》2015年第9期80-83,共4页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目(31272415)

摘　　要：利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白(CFL2)和肌细胞增强因子-2(MEF2C)之间的相互作用关系。构建带绿色荧光蛋白(GFP)的p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经双酶切鉴定正确后,分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌细胞(Hela),利用免疫共沉淀方法验证CFL2和MEF2C之间的相互作用关系。结果表明,p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFPhis-MEF2C重组载体共转染Hela细胞,分别用抗CFL2和抗MEF2C抗体沉淀蛋白复合物,用MEF2C和CFL2抗体进行Western blot检测,检测到p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C和p EGFP-N1-CFL2的表达。本试验成功构建p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C真核表达重组载体,在Hela细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了CFL2和MEF2C之间存在相互作用。

关 键 词：CFL2 MEF2C 载体构建 相互作用 免疫共沉淀 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]