甘草多糖对脐血源单核细胞分化为树突状细胞过程中NF-kBp65表达的影响  

作　　者：唐中生[1] 吴春朋[1] 谢高宇[1] 陆莹[1] 罗亚非[1] 

机构地区：[1]贵阳中医学院,贵州贵阳550025

出　　处：《云南中医中药杂志》2015年第10期60-63,共4页Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica

基　　金：贵州省中医药管理局中医药;民族医药科学技术研究课题(NO:QZYY2010-04);贵州省科技厅和贵阳中医学院联合基金课题(NO:黔科合中药字〔2011〕LKZ7036号);贵州省科学技术基金项目(NO:黔科合J字〔2012〕2078号)

摘　　要：目的观察脐血源单核细胞分化为树突状细胞(DC)的过程中,核转录因子-k B p65(NF-k B p65)的表达以及GPS对单核细胞分化为DC的影响。方法无菌条件下采集脐血,非连续密度梯度离心获取脐血单核细胞;用含粒单细胞刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)、脂多糖(LPS)和GPS的RPMI-1640培养液分别对细胞因子组、GPS组、联合培养组的单核细胞进行体外培养;应用倒置相差显微镜、瑞氏染色和CD86、CD83、HLA-DR、S-100的免疫细胞化学法鉴定单核细胞和DC。动态观察单核细胞分化为DC过程中不同时间点的NF-k B p65的表达,并进行图像和SPSS软件分析。结果 CD86、CD83、HLADR、S-100的免疫细胞化学法证实所获单核细胞和DC符合各自的形态和表型特征。在含GM-CSF和IL-4的RPMI-1640培养液培养7d时,单核细胞分化成未成熟DC(im DC);在含GM-CSF、IL-4和LPS的RPMI-1640培养液继续培养5d时,imDC分化为成熟DC(m DC),两者的细胞核内NF-k B p65表达具有显著性差异(P<0.05)。单纯用只含GPS的RPMI-1640培养液培养单核细胞至7d时,可见其细胞核呈NF-k Bp65阳性,已分化为im DC,继续培养5d,则分化为DC。用含GMCSF、IL-4和甘草多糖的RPMI-1640培养液联合培养7 d时,则该单核细胞分化为im DC;加入LPS后继续培养5 d,im DC的细胞核呈NF-k Bp65强阳性,免疫细胞化学法证实im DC已经分化为DC。联合培养组细胞的表型表达均强于细胞因子组和GPS组(P<0.05)。结论脐血来源单核细胞分化为im DC和m DC过程中,细胞核内NF-k B p65表达逐渐增强。单纯用GPS(400μg/m L)可以刺激单核细胞分化为im DC和m DC,效果逊于细胞因子GM-CSF、IL-4和LPS共同培养。

关 键 词：树突状细胞 细胞表面抗原 核转录因子-k B P65 甘草多糖 免疫细胞化学 脐血 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]