用液相芯片方法同时检测流感病毒H5N1和H7N9亚型  

Determination of Influenza Virus H5N1 and H7N9 Using MASA Technology

作　　者：袁静[1] 鲍琳琳[1] 魏强[1] 秦川[1] 许黎黎[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,北京100021

出　　处：《病毒学报》2015年第6期607-614,共8页Chinese Journal of Virology

基　　金：十二五科技重大专项(2012ZX10004501-004-003,2012ZX10004501-004-004);国家自然科学基金(31370203);北京市自然科学基金(7142106);协和青年教师培养项目(2012Y2)

摘　　要：基于液相芯片(Multi-analyte suspension array,MASA)技术建立一种同时对H5N1和H7N9亚型流感病毒进行快速检测的新方法。对国家生物技术信息中心(National center for biotechnology information,NCBI)和欧洲生物信息学中心(The european bioinformatics institute,EBI)核酸数据库中已有的H5、N1、H7和N9核酸片段进行比对分析,并参考世界卫生组织,美国疾病预防控制中心和中国疾病预防控制中心等的相关资料,设计简并引物和探针,将合成的探针与荧光编码微球进行偶联,建立检测方法。利用该方法检测H5N1和H7N9亚型流感病毒和其它常见亚型(H1N1、甲流H1N1、H5N2、BH3N2和H9N2)的标本。建立了一种快速的流感病毒分型方法。这种方法可以同时检测H5N1和H7N9,用已知基因型的样本对这种方法进行验证显示它的特异性很好。灵敏度分析实验也表明这种方法具有很高的灵敏度,可以对含有5个拷贝的样本进行有效的检测。利用液相芯片技术研制的H5N1和H7N9亚型流感病毒检测方法能够用于流感病毒H5N1和H7N9亚型的快速、灵敏、特异性的检测及鉴定。To set up a new rapid method for the rapid determination of influenza virus H5N1 and H7N9basing on the Multi-Analyte Suspension Array（MASA）technology.Sequence analysis and design of degenerate primers and specific probes were set in the comparison and analysis of H5,N1,H7 and N9genes.In combination with MASA technology,these primers and probes were used for the determination of samples of H5N1 and H7N9and other subtypes（H1N1,PH1N1,H5N2,H3N2 and H9N2）.We developed a rapid determination method.This method had high specificity and sensitivity that could detect H5N1 and H7N9at one time,and could detect samples that containing 10 copies of H5N1 and H7N9.This determination method could be used for rapid determination of influenza virus H5N1 and H7N9at one time.

关 键 词：液相芯片技术 流感病毒 H5N1亚型 H7N9亚型 

分 类 号：R373.1[医药卫生—病原生物学] Q78[医药卫生—基础医学]